僧帽牡蛎低分子活性肽组分BPO-L对人肺腺癌A549细胞的诱导分化作用研究

摘要

应用从僧帽牡蛎中分离提取的牡蛎低分子活性肽BPO-L处理人肺腺癌A549细胞,以HMBA和姜黄素为平行对照,观察鉴定牡蛎低分子活性肽对人肺腺癌细胞的生物学效应及其作用性质,并进一步探索牡蛎低分子活性肽对人肺腺癌细胞的作用机制.研究结果表明,牡蛎低分子活性肽能有效抑制人肺腺癌A549细胞恶性增殖活动,使细胞阻滞于G<,0>/G<,1>期,逆转其恶性表型并调节和干预细胞癌基因和抑癌基因的表达.从而证实牡蛎低分子活性肽对肺癌细胞具有一定的诱导分化作用.

目录

前言

材料与方法

1.牡蛎低分子活性肽的分离与提取

1.1牡蛎酸提物的制备

1.2牡蛎低分子活性物质的分离提取与脱盐

1.3牡蛎低分子活性物质离子交换柱层析

1.4牡蛎低分子活性物质的SDS-PAGE凝胶电泳

2.细胞培养与诱导分化处理

2.1细胞株

2.2细胞培养

2.3诱导分化剂与诱导分化

3.细胞生长曲线测定

4.细胞分裂指数观察

5.细胞周期测定

6.光学显微镜样品制备与观察

7.透射电镜样品制备与观察

8.肺癌相关癌基因蛋白免疫细胞化学检测

9.肺癌相关抑癌基因蛋白免疫细胞化学检测

10.统计分析

实验结果

1.牡蛎低分子活性物质的分离提取与鉴定

2.BPO-L物质对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用

2.1长曲线测定

2.2分裂指数观察

2.3细胞周期测定

3.BPO-L对细胞形态与超微结构变化的影响

3.1光学显微镜观察

3.2透射电子显微镜观察

4.BPO-L、HMBA及其组合对A549细胞癌基因与抑癌基因表达的影响

4.1 BPO-L、HMBA及其组合对A549细胞相关癌基因表达的影响

4.2 BPO-L、HMBA及其组合对A549细胞相关抑癌基因表达 的影响

讨论

1.BPO-L的分离提取和鉴定

2.BPO-L对A549细胞的诱导分化作用

2.1 BPO-L对A549细胞恶性增殖的抑制作用

2.2 BPO-L处理后A549细胞形态学和超微结构的变化

2.3 BPO-L对A549细胞的联合诱导作用

3.BPO-L诱导人肺腺癌细胞分化的作用机理

3.1 BPO-L对A549细胞相关癌基因，抑癌基因表达的影响

3.2 BPO-L调控A549细胞相关癌基因、抑癌基因的可能途径

4.牡蛎低分子活性肽的抗肿瘤作用的理论与实践意义

结论

参考文献

致谢

图版及其说明