左金胃漂浮缓释片指纹图谱及多组分释放的研究

摘要

目的:1.建立左金胃漂浮缓释片药材、提取物及制剂的指纹图谱，完善其质量标准。
　　2.对左金胃漂浮缓释片的体外释放进行研究，考察左金胃漂浮缓释片中3个指标成分:小檗碱、吴茱萸内酯及吴茱萸次碱，以及制剂整体的释放趋势的相似性。
　　3.建立左金胃漂浮缓释片体内释放的指纹图谱，考察左金胃漂浮缓释片中小檗碱、吴茱萸内酯、吴茱萸次碱及制剂在体内释趋势的相似性。
　　4.对左金胃漂浮缓释片体内外释放数据进行拟合、分析，探索左金胃漂浮缓释片体内外释放的相关性。
　　方法:1.采用高效液相色谱法，以岛津WondaSil C18 Superb5μm，250mm×4.6mm，乙腈-水（含0.018mol/L磷酸二氢钾）为流动相，梯度洗脱，检测波长220nm，流速1ml/min，温度35℃。建立黄连、吴茱萸两味药材的指纹图谱;将黄连和吴茱萸分别提取制备成干浸膏后，按6∶1的比例进行混合，建立提取物的高效液相色谱指纹图谱;按照一定的处方比例制备左金胃漂浮缓释片，采用同样的方法建立制剂的高效液相色谱指纹图谱。
　　2.采用《中国药典》2010年版二部附录中的浆法测定左金胃漂浮缓释片的体外累积释放度，分别在1、2、4、6、8、10、12h取样，建立各时间点的指纹图谱，同时建立左金胃漂浮缓释片体外的全溶样品的指纹图谱，采用相似因子法考察小檗碱、吴茱萸内酯、吴茱萸次碱和左金胃漂浮缓释片制剂整体体外释放趋势的相似性。
　　3.给家兔灌服完整左金胃漂浮缓释片后，在1、2、4、6、8、10、12h处死一组家兔，取其胃内容物，建立各时间点的指纹图谱，同时建立左金胃漂浮缓释片体内的全溶样品指纹图谱，采用相似因子法考察小檗碱、吴茱萸内酯、吴茱萸次碱和左金胃漂浮缓释片制剂整体体内释放趋势的相似性。
　　4.运用Origin软件对左金胃漂浮缓释片体内外的数据进行拟合，得到相关方程，刻画左金胃漂浮缓释片体内外释放的相关性。
　　结果:1.建立了黄连、吴茱萸、提取物和左金胃漂浮缓释片（制剂）的标准指纹图谱，精密度良好，重复性较高，样品24h稳定性好。
　　2.小檗碱与制剂的相似因子为57，吴茱萸内酯与吴茱萸次碱的相似因子为58，小檗碱与吴茱萸内酯、吴茱萸次碱的相似因子分别为35、37，吴茱萸内酯、吴茱萸次碱与制剂的相似因子分别为43、46。
　　3.在10h内小檗碱与吴茱萸内酯、吴茱萸次碱的相似因子分别为52、61.5，与制剂的相似因子为66.4，吴茱萸内酯与吴茱萸次碱的相似因子为70，与制剂的相似因子分别为46.5、53.7。用Origin软件计算出未检测值后，12h内小檗碱、吴茱萸次碱与制剂的释放因子分别为67.9，54.7，吴茱萸内酯与吴茱萸次碱的相似因子为54.3，吴茱萸次碱与小檗碱的相似因子为63.4。小檗碱与吴茱萸内酯的相似因子为52.9，吴茱萸内酯与制剂的相似因子为54.7。
　　4.根据实测值所得的小檗碱的相关方程为:Y=-2.582+0.9933X R=0.9988，吴茱萸内酯的相关方程为:Y=-0.58615+1.27023X R=0.96515，吴茱萸次碱的相关方程为:Y=-151.66097×exp(-x/33.28618)+102.45679 R=0.93734，左金胃漂浮缓释片（制剂）整体的相关方程为:Y=-4.57331+1.57409×X-0.00541×X2 R=0.99847;结合Origin软件所求出的理论值后，吴茱萸内酯的相关方程为:Y=-25.12343+2.33131×X-0.01017×X2 R=0.974，吴茱萸次碱的相关方程为:Y=-26.02506+2.56925×X-0.01378×X2R=0.95335。
　　结论:建立的左金胃漂浮缓释片药材、提取物及制剂的指纹图谱方法简便、可靠、重复性良好，完善了左金胃漂浮缓释片的质量标准。
　　体外释放研究表明:小檗碱与制剂的释放行为相似，吴茱萸内酯与吴茱萸次碱的释放行为相似，小檗碱与吴茱萸内酯、吴茱萸次碱，吴茱萸内酯与制剂，吴茱萸次碱与制剂的释放行为均不相似，左金胃漂浮缓释片为部分同步释放的制剂。
　　体内释放研究表明:在10h内，小檗碱的释放行为与吴茱萸内酯、吴茱萸次碱及制剂相似;吴茱萸次碱与吴茱萸内酯及制剂的释放行为相似;而吴茱萸内酯与制剂的释放行为不一致。而结合理论值后12h的结果与10时的实际测量的释放趋势基本一致。
　　体内外释放相关性研究表明:所拟合出的相关方程的相关系数均大于0.9，相关性较好，可以用所得的方程具体的描述左金胃漂浮缓释片体内外释放的相关性。