镰形棘豆黄酮霜的制备及抗中波紫外线辐射性能研究

摘要

UVB(Ultraviolet radiation B)，是导致皮肤晒伤的根源，使用防晒剂是目前预防UVB损伤的重要手段。与化学、物理防晒剂相比，天然防晒剂具有许多优势。本文首先对天然防晒剂的特点及研发现况进行综述，并对高原特色植物镰形棘豆的化学成分、药理作用、临床应用等方面进行概述，同时提出该植物应用于紫外线防御的潜在价值。研究内容主要包括以下方面：
　　 1．镰形棘豆黄酮化合物的制备与分析方法建立对药材中的黄酮类化合物进行提取富集，并对其中的鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷RN进行含量测定方法建立。采用HPLC法，色谱柱：SymmetryC18柱(5μm，4.6mm×250mm);流动相：1％乙酸水溶液-乙腈(79：21)；流速：1.0mL/min;检测波长：350nm。结果表明，药材不同部位经不同溶剂提取所得含量差别较大。溶剂对该化合物的提取率由高至低依次为甲醇，95%乙醇、水，药材叶中含量比根高。此外，黄酮提取物中的RN含量较大。建立的分析方法简便、准确，可用于该药材及相关制剂的质量控制。
　　 2．镰形棘豆黄酮霜的制备及质量评价采用正交试验，以乳化剂比例、乳化剂加入方式及乳化温度为考察因素，以霜剂质量、稳定性等为考察指标，研究霜剂基质的最佳制备工艺与处方。同时考察镰形棘豆黄酮提取物的适宜添加量，并对霜剂进行质量评价。结果表明，最佳制备工艺与处方，即司盘-60与吐温-80比例为20:35，司盘-60加入油相，吐温-80加入水相，在80℃下进行乳化。2.5%的黄酮霜质量稳定，紫外吸收性能强，相关质量指标符合要求。
　　 3．镰形棘豆黄酮霜制备的优化研究脱色工艺研究中，选定温度、时间和活性炭用量为考察因素，以脱色液颜色、260nm～420nm紫外吸收情况和黄酮类化合物含量为考察指标进行正交试验。结果在温度40℃下，加入1%活性炭，搅拌5min时，所得脱色滤液颜色浅，有效成分保留多。
　　 复方研究中，以黄酮提取物、纳米TiO2和维生素E作为考察因素，以复方霜剂的紫外吸收情况和颜色作为考察指标，进行正交试验。结果确定以黄酮提取物为主成分的最佳配方，即黄酮提取物2%，纳米TiO21%，维生素E0.5%，由该最佳配方制得的霜剂颜色浅，紫外吸收性能强，防晒光谱范围扩大，防晒指数提高。
　　 4．镰形棘豆黄酮化合物抗UVB损伤药效学研究体内药效学研究证明，镰形棘豆黄酮霜剂对UVB引起的大鼠皮肤损伤具有良好的防护性能。对黄酮提取物进行分离，进行体外活性筛选，选取活性较强的一部分FOF和鼠李柠檬素-3-O-β-新橙皮糖苷RN进行体外光保护作用研究。以HaCaT细胞UVB紫外线照射为模型，以不同剂量UVB进行照射，加入FOF和RN进行干预处理，观察细胞受损程度，MTT法检测细胞增殖活性，ELISA法检测TNF-α、IL-10分泌量，RT-PCR检测TNF-αmRNA和IL-10mRNA的表达量，观察体外光保护效能，并研究相关作用机制。结果表明，FOF和RN均能减轻UVB对HaCaT细胞的损伤，具有一定的体外光保护作用，且均能降低炎症因子TNF-α、IL-10的分泌量及其mRNA表达量。抑制炎症细胞因子分泌可能是镰形棘豆黄酮类化合物减轻UVB辐射损伤的机制之一。