多聚唾液酸和三聚唾液酸在肺癌、乳腺癌、胃癌和肠癌中的表达及其意义

摘要

多聚唾液酸(Poly-sia)是以α2，8键连接唾液酸残基而形成的线性均一多聚的碳水化合物，在细胞间黏附、细胞迁移以及神经发育中发挥了重要的作用，研究表明PolySia的表达与某些癌症的恶性程度、浸润、转移相关，认为其可作为某些癌症判断预后的临床标志物，但目前尚缺乏其与胃癌、肠癌，乳腺癌的病理关系。三聚唾液酸(TriSia)是含有三个唾液酸残基的线性糖链，主要黏附于神经节苷脂和蛋白质上，由于缺少识别糖蛋白上TriSia的抗体，TriSia的合成和功能及其作用机制都尚属未知，其在肿瘤中的表达及其意义尚未见报道。本研究采用westernblot的方法来检测93例肺癌，52例乳腺癌，38例胃癌和72例肠癌病人的癌组织和淋巴结组织的PolySia和TriSia的表达特点和差异，探讨其在这四种肿瘤中的意义。
　　结果显示肺癌、乳腺癌、胃癌、肠癌组织中的PolySia黏附在分子量为140kDa和120kDa的NCAM亚体上且以前者为主。TriSia所黏附的复合物在80kDa、130kDa和170kDa的分子量上均有表达，但主要以后两者的表达为主。肺癌、乳腺癌、胃癌和肠癌四种癌症中，PolySia在其癌组织中的阳性表达率分别为81.72％，63.46％，81.58和81.94％，其在淋巴结组织中的阳性表达率分别为93.55％，66.67％，81.25％和73.33％;TriSia在其癌症组织中的阳性表达率为74.19％，67.31％，86.84％和87.50％，而其在淋巴结组织中阳性表达率分别为79.03％,66.67％,68.75％和73.33％。
　　通过这些研究结果我们可得到以下结论:一、PolySia在所研究的四种癌症中均有较高的阳性表达率，提示PolySia可能为其相应临床筛查的肿瘤标志物，从高到低依次为:肠癌、肺癌、胃癌和乳腺癌。PolySia在淋巴结中的表达不同于癌组织，其阳性表达率为肺癌＞胃癌＞肠癌＞乳腺癌。在同种癌症中，PolySia在肿瘤组织和淋巴结组织的阳性表达率的一致性有所不同，其中肺癌差别最大，表现为淋巴结组织高于肿瘤组织。在检测组织中PolySia表达的灵敏度时，对于肺癌和乳腺癌，检测淋巴结中的PolySia灵敏度较高，尤其是肺癌，在胃癌中癌组织和淋巴结检测PolySia的灵敏度较为一致，肠癌中则检测癌组织中的PolySia表达更为灵敏。二、TriSia在所检测的四种癌组织中也有较高的阳性表达率，这也使其可能成为这四种癌症临床检测的肿瘤标志物。但与PolySia不同，TriSia在所检测的癌组织的阳性表达率由高到低依次为:肠癌、胃癌、肺癌和乳腺癌，且肠癌和胃癌这两种消化道肿瘤癌组织中的TriSia阳性表达率较为接近。而在淋巴结组织中，TriSia阳性表达率由高到低依次为:肺癌、肠癌、胃癌和乳腺癌。另外，胃癌、肠癌和乳腺癌中癌组织TriSia的阳性表达率均高于相对应的淋巴结组织，因此对TriSia的检测在癌组织中灵敏度较高，而肺癌反之。三、同种组织中PolySia和TriSia的表达也不相同。癌组织中，肺癌PolySia阳性表达率高于TriSia，但其余三种癌症差别较小。淋巴结组织中，对于乳腺癌和肠癌，PolySia和TriSia的阳性表达率较一致，而对于肺癌和胃癌PolySia阳性表达率均高于TriSia且差别较大。说明乳腺癌、胃癌和肠癌的癌组织中检测TriSia的灵敏度略高于PolySia，在肺癌癌组织，肺癌淋巴结和胃癌淋巴结中，检测PolySia的灵敏度均高于TriSia。四、PolySia和TriSia与肺癌、乳腺癌、胃癌和肠癌的分化程度和有无淋巴结转移均无显著性关联。五、Westernblot对多聚唾液酸的检测具有较高的灵敏度，可以成为通过对PolySia的检测进行肿瘤筛查的有效手段。

目录

声明

摘要

Contents

缩略词表

第1章 前言

1．1 多聚唾液酸和三聚唾液酸的结构

1．1．1 多聚唾液酸的结构

1．1．2 三聚唾液酸的结构

1．2 多聚唾液酸和三聚唾液酸的生物合成

1．2．1 α2，8唾液酸转移酶家族

1．2．2 多聚唾液酸和三聚唾液酸的合成

1．3 多聚唾液酸与三聚唾液酸的表达及其功能

1．3．1 多聚唾液酸的表达

1．3．2 三聚唾液酸的表达及其功能

1．4 多聚唾液酸和多聚唾液酸转移酶在肿瘤中的表达的研究现状和意义

1．4．1 小细胞肺癌与非小细胞癌

1．4．2 成神经细胞瘤

1．4．3 神经胶质瘤

1．4．4 横纹肌肉瘤，枯萎瘤

1．4．5 垂体瘤

1．5 肺癌、乳腺癌、胃癌和肠癌标志物的研究进展

1．5．1 肺癌标志物的研究进展

1．5．2 乳腺癌标志物的研究进展

1．5．3 胃癌的标志物的研究进展

1．5．4 肠癌标志物的研究进展

1．6 本论文的目的、研究内容和意义

第2章 材料与方法

2．1 材料

2．1．1 肺癌组织标本

2．1．2 乳腺癌组织标本

2．1．3 胃癌组织标本

2．1．4 肠癌组织标本

2．1．5 主要试剂及耗材

2．1．6 主要仪器及设备

2．1．7 常用缓冲液的配制

2．2 方法

2．2．1 蛋白提取

2．2．2 测定蛋白浓度

2．2．3 酶切反应和蛋白变性

2．2．4 Western blot

2．2．5 阳性结果的判定标准

2．4 数据处理

第3章 结果与分析

3．1 肺癌结果与分析

3．1．1 肺癌和淋巴结组织中PolySia和TriSia的表达情况

3．1．2 不同分化程度的肺癌中PolySia的表达情况

3．1．3 小细胞肺癌与非小细胞肺癌中PolySia和TriSia的表达情况

3．1．4 PolySia和TriSia的表达与肺癌有无淋巴结转移的关系分析

3．2 乳腺癌结果与分析

3．2．1 乳腺癌组织和淋巴结组织中PolySia和TriSia的表达情况

3．2．2 PolySia和TriSia表达与乳腺癌有无淋巴结转移的关系分析

3．3 胃癌结果与分析

3．3．1 胃癌和淋巴结组织中PolySia和TriSia的表达情况

3．3．2 不同分化程度的胃癌中PolySia的表达情况

3．3．3 PolySia和TriSia的表达与胃癌有无淋巴结转移的关系分析

3．4 肠癌结果与分析

3．4．1 肠癌和淋巴结组织中PolySia和TriSia的表达情况

3．4．2 不同分化程度的肠癌中PolySia的表达情况

3．4．3 PolySia和TriSia的表达与肠癌有无淋巴结转移的关系分析

第4章 讨论与结论

参考文献

致谢