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养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠抑瘤作用及IL-6、IL-8影响的实验研究

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目录

声明

摘要

前言

1.1肺癌病名的认识

1.2肺癌病因病机的认识

1.3阴虚热毒病机的提出

2 养阴解毒方的药物组成、功效及现代药理研究

2.1养阴解毒方药物功效及现代药理研究

3 IL-6、IL-8与肺癌

3.1 IL-6在肺癌中的表达及意义

3.2 IL-8在肺癌中的表达及意义

1 实验材料

1.1动物

1.2细胞株

1.3实验药品及制备

1.4主要实验仪器、试剂、耗材

2 实验步骤

2.1 Lewis肺癌细胞复苏、培养、传代及冻存

2.2 Lewis肺癌模型建立

2.3分组及给药

2.4标本采集

3 检测指标及方法

3.1一般情况观察

3.2瘤重及抑瘤率

4.1实验期间小鼠一般情况观察

4.2养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长的影响

4.3养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠血清IL-6的影响

4.4养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠血清IL-8的影响

5讨论与结论

5.1讨论分析

5.2结论

总结与展望

参考文献

附录

致谢

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摘要

目的:
  观察养阴解毒方对Lewis肺癌荷瘤小鼠一般情况、肿瘤生长抑制情况及血清中细胞因子IL-6、IL-8表达水平的影响,初步探讨养阴解毒方对Lewis肺癌小鼠的可能作用机制。
  方法:
  复制Lewis肺癌C57BL/6小鼠模型60只,造模后随机将小鼠分为6组:模型组、顺铂组、养阴解毒方低、中、高剂量组(简称:中药低、中、高剂量组)、及养阴解毒方中剂量+顺铂组(简称:联合治疗组),每组10只。模型组:0.2ml/10g生理盐水灌胃14d,并分别在第7、9、11天腹腔注射生理盐水1ml;顺铂组:0.2ml/10g生理盐水灌胃14d,并分别在第7、9、11天腹腔注射DDP溶液1ml(含DDP0.1mg,小鼠平均体重20g,5mg/kg);中药低剂量组:以0.2ml/10g(浓度0.75g/ml)中药液灌胃14d,分别在第7、9、11天腹腔注射生理盐水1ml;中药中剂量组:以0.2ml/10g(浓度1.5g/ml)中药液灌胃14d,分别在第7、9、11天腹腔注射生理盐水1ml;中药高剂量组:以0.2ml/10g(浓度3g/ml)中药液灌胃14d,分别在第7、9、11天腹腔注射生理盐水1ml;联合治疗组:采用灌胃中药液(剂量、浓度及方法同中药中剂量组)和腹腔注射顺铂溶液(剂量、浓度及方法同顺铂组)。实验期间观察各组小鼠的一般情况,并做详细记录;最后一次给药24h后将小鼠脱颈椎处死,剥离肿瘤组织后称重并计算抑瘤率;眼眶取血法收集小鼠血清,用ELISA法检测荷瘤小鼠血清IL-6、IL-8表达水平。
  结果:
  1.小鼠的一般情况:模型组、顺铂组小鼠出现进食减少,被毛光泽减弱,精神萎靡,喜欢聚集、行动迟缓现象,以模型组尤其明显。中药各剂量组、联合用药组精神状态一般,觅食积极,无明显精神萎靡、喜聚集等现象。
  2.瘤体重量和抑瘤率:(1)各组平均瘤重:平均瘤重从小到大依次是:联合治疗组、顺铂组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、模型组。与模型组比较,各治疗组移植瘤重量均有所减轻,但中药低剂量组差异无统计学意义(P>0.05),其余各组瘤重明显减轻(P<0.01)。与中药各剂量组比较,顺铂组瘤体重量减轻明显,有统计学意义(P<0.01)。与其他治疗组比较,联合治疗组瘤体重量减轻明显,有统计学意义(P<0.01)。与中药低、中剂量组比较,中药高剂量组瘤体重量减轻,有统计学意义(P<0.05)。与中药低剂量组比较,中药中剂量组瘤重减轻,有统计学意义(P<0.05)。(2)抑瘤率:中药低、中、高剂量组抑瘤率分别为6.0%、20.1%、34.9%,表明具有一定的剂量依赖性。顺铂组、联合治疗组抑瘤率分别是55.6%、70.1%。以上结果显示联合治疗组抑瘤率最高,其次为顺铂组、中药高、中、低剂量组及模型组。
  3.血清IL-6、IL-8:与模型组比较,各治疗组血清IL-6、IL-8表达水平均较低,除中药低剂量组差异无统计学意义外(P>0.05),其余各组差异具有统计学意义(P<0.05)。与中药各剂量组比较,顺铂组血清IL-6、IL-8表达水平下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。与中药低剂量组比较,中药中、高剂量组血清IL-6、IL-8表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与中药中剂量组比较,中药高剂量组血清IL-6、IL-8表达水平降低(P<0.05)。与顺铂组比较,联合治疗组血清IL-6、IL-8表达水平降低(P<0.05)。
  结论:
  1.养阴解毒方可以在一定程度上改善Lewis肺癌荷瘤小鼠的一般情况。
  2.养阴解毒方对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长具有一定的抑制作用。
  3.养阴解毒方能降低Lewis肺癌荷瘤小鼠血清IL-6、IL-8表达水平。
  4.养阴解毒方及联合顺铂均能抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长、降低荷瘤小鼠血清IL-6、IL-8表达水平。

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