类固醇激素受体辅激活子3(SRc-3)在葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎中的作用

摘要

类固醇激素受体辅激活子3（steroid receptor coactivator3，SRC-3）是辅调节子家族的一员，它可以与多种核受体及转录因子相互作用进而增强它们的转录活性。实验室前期研究表明，SRC-3可以通过与NICD及MAML1相互作用来增强Notch信号通路从而促进结直肠癌的发生发展，近期研究也发现SRC-3在柠檬酸杆菌（Citrobacter rodentium）诱导的小鼠细菌性结肠炎中起重要的保护作用，说明SRC-3在肠道稳态和免疫反应中起着重要的作用。为了探究SRC-3是否在溃疡性结肠炎(UC)中存在一定作用，我们首先检索GEO数据库中溃疡性结肠炎患者的信息发现，与正常肠组织相比，患者溃疡病变组织中SRC-3的mRNA水平显著上调，这说明SRC-3可能在溃疡性结肠炎中起着保护作用。另外，葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎疾病模型的实验结果也表明，SRC-3缺失会导致更严重的病理反应和更高的死亡率。我们通过进一步研究发现，SRC-3可能通过直接调控KLF4的表达促进杯状细胞的分化和成熟。尽管SRC-3缺失不影响粘液的主要组成蛋白MUC2的mRNA水平，却会导致NLRP6的表达下调，而NLRP6下调会导致粘液蛋白分泌异常。这些结果解释了为什么SRC-3敲除小鼠的肠腔相较于野生型小鼠具有较薄的粘液层。并且SRC-3缺失将引起TFF3的表达异常，这导致了SRC-3敲除小鼠在肠道损伤后修复能力的下降。因此，SRC-3可以通过调控杯状细胞的功能和分化维持肠道稳态，并且对肠道损伤后修复起着重要作用。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 类固醇激素受体辅激活子(SRC)家族与类固醇激素受体辅激活子3(SRC-3)

1．1．1 类固醇激素受体辅激活子(SRC)家族概述

1．1．2 类固醇激素受体辅激活子(SRC)家族蛋白结构与分子功能

1．1．3 类固醇激素受体辅激活子3(SRC-3)基因定位、表达与翻译后蛋白修饰

1．1．4 类固醇激素受体辅激活子3(SRC-3)生物学功能

1．2 消化道与微生物

1．2．1 消化道微生物存在情况概述

1．2．2 小鼠消化道正常菌群种群组成概述

1．2．3 肠道粘膜屏障的组成部分

1．3 炎症性肠炎(IBD)

1．3．1 炎症性肠炎(IBD)基本情况概述

1．3．2 炎症性肠炎(IBD)发病机理

1．3．3 葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎的小鼠疾病模型

1．4 立题背景

第二章 材料和方法

2．1 材料

2．1．1 小鼠

2．1．2 质粒

2．1．3 菌株

2．1．4 细胞

2．1．5 主要试剂

2．1．6 主要仪器

2．2 方法

2．2．1 DNA相关实验及方法

2．2．2 RNA相关实验及方法

2．2．3 蛋白相关实验及方法

2．2．4 细胞相关实验

2．2．5 小鼠相关实验及方法

2．2．6 病理检测相关实验

第三章 结果与分析

3．1 在溃疡性结肠炎临床样本中SRC-3 mRNA表达水平升表达

3．2 在DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎，SRC-3敲除小鼠比野生型小鼠更加敏感

3．3 SRC-3敲除小鼠在腹泻、便血和结肠长度变化等病理指标方面比野生型小鼠更加严重

3．4 SRC-3缺失不影响小鼠粪便中的菌群变化

3．5 SRC-3敲除小鼠的结肠中段比野生小鼠呈现更严重的组织学损伤

3．6 SRC-3敲除小鼠结肠比野生小鼠含有更多的前炎症因子

3．7 SRC-3敲除小鼠结肠比野生小鼠含较少的杯状细胞

3．8 SRC-3可能通过直接调控转录因子KLF4调控杯状细胞的分化

3．9 SRC-3缺失引起的部分粘液层成分mRNA含量降低

3．10 与野生型小鼠相比，SRC-3敲除小鼠的粘液层厚度显著薄

3．11 SRC-3敲除小鼠粘液分泌过程中相关基因的表达存在异常

3．12 在LS174T细胞中敲低SRC-3使粘液相关蛋白的mRNA和蛋白水平均下降

第四章 讨论

参考文献

致谢