番茄红素及维生素E对燃煤型氟中毒致大鼠睾丸组织中Clusterin蛋白表达的影响及机制

摘要

目的：研究拟以燃煤型氟中毒病区玉米为饲料、建立动物中毒模型并利用抗氧化剂对燃煤型氟中毒致雄性性生殖损害进行干预，探索可能的干预机制；并比较不同抗氧化剂的作用，以寻找较为有效的治疗药物。
　　方法：将30只雄性SD大鼠分为低氟组、中氟组、髙氟组、髙氟组+维生素E组、髙氟组+番茄红素组、对照组共六组动物模型每组5只。各染毒组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米的饲料，构建燃煤型氟中毒动物模型,并在两个药物干预组中分别添加维生素E和番茄红素。于120d处死大鼠。采用HE染色，光镜下观察睾丸组织病理学改变；氟离子选择电极法检测大鼠尿氟含量；原位缺口末端标记（TUNEL）染色，观察生精细胞凋亡的情况；采用免疫组化法对大鼠睾丸组织中 Clusterin蛋白表达进行定位、Western blot法检测大鼠睾丸组织中Clusterin蛋白表达变化。
　　结果：成功建立大鼠氟中毒模型。睾丸生精小管均发生不同程度的损害,120d时各染氟组大鼠尿氟含量均明显升高（P均<0.01）。各染氟组大鼠睾丸组织Clusterin蛋白含量均明显降低（P<0.05或P<0.01），且随染氟剂量增加而降低，而两个药物干预组的含量要高于高氟组和中氟组（P<0.05），而番茄红素组与低氟组无明显差异（P>0.05）,维生素E组低于低氟组(P<0.05)；番茄红素组表达量高于维生素E组(P<0.05)。各染氟组单位生精小管细胞凋亡指数（AI）明显高于对照组（P<0.05或0.01）；各染氟组生精细胞凋亡指数随染氟剂量的增加呈升高趋势，且各染氟组间差异具有统计学意义（P<0.05）；而两个药物干预组的凋亡指数要低于高氟组（P<0.05），而番茄红素组与中氟组无明显差异（P>0.05）,维生素E组高于中氟组（P<0.05）。对照组生精细胞偶见有凋亡发生
　　结论：燃煤型氟中毒可引起大鼠睾丸内氧化系统与抗氧化系统失衡，生精细胞凋亡率增加；Clusterin蛋白的表达降低与氟中毒致睾丸生殖功能降低有着密切关系。抗氧化剂可显著提高Clusterin蛋白的表达，降低生殖细胞凋亡率，提高对氟中毒致生殖毒性损伤的拮抗作用，改善雄性生殖功能的损伤。

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附 综述: 番茄红素及维生素E对氟中毒致大鼠睾丸组织氧化应激损伤拮抗作用的研究进展