DENV2感染的埃及伊蚊唾液腺差异蛋白质组学研究

摘要

【目的】构建埃及伊蚊（Aedes aegypti）雌蚊感染登革Ⅱ型病毒（dengue virus typeⅡ，DENV2）前后唾液腺（salivary gland，SG）差异蛋白质组图谱，筛选与DENV2感染相关的唾液腺蛋白。
　　【方法】采用细胞培养技术培养白纹伊蚊C6/36细胞以增殖DENV2，采用PCR技术和免疫荧光技术证实DENV2的感染，以TCID50法检测感染细胞的登革病毒滴度；采用胸腔微注射法将一定滴度的病毒注射入5日龄埃及伊蚊雌蚊（生理盐水为对照组）。14日后，解剖蚊唾液腺，采用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）技术联合二维液相色谱串联质谱技术，构建DENV2感染的埃及伊蚊唾液腺差异蛋白组图谱，并对鉴定的差异蛋白质进行生物信息学分析。
　　【结果】
　　1、DENV2在C6/36细胞增殖成功，TCID50为10-6；
　　2、DENV2成功感染埃及伊蚊雌蚊唾液腺；
　　3、质谱分析结果显示共鉴定到埃及伊蚊唾液腺蛋白1350个蛋白质，其中有定量信息的有1330个。以差异表达上调≥1.2倍、差异表达下调≤0.8倍为标准，共筛选出9个差异表达蛋白，其中2个表达下调蛋白（无功能线索），7个表达上调蛋白。上调的蛋白主要参与蚊虫氧化还原、免疫、代谢等相关功能。
　　【结论】成功构建埃及伊蚊雌蚊感染登革Ⅱ型病毒前后唾液腺差异蛋白质组图谱，获得可能受DENV2调适的埃及伊蚊唾液腺功能蛋白9个。

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封面

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中文摘要

一、前言

二、材料与方法

三、结果

四、讨论

五、小结

参考文献

英文摘要

致谢

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附：综述: 病原生物与蚊媒相互作用关系的研究