异硫氰酸苯已酯(PHI)诱导前列腺癌PC3细胞凋亡的分子机制研究

摘要

目的:观察异硫氰酸苯己酯(PHI)对前列腺癌PC3细胞株增殖、凋亡的作用，研究PHI对前列腺癌细胞凋亡相关蛋白、组蛋白乙酰化、甲基化、Akt信号转导通路的影响，阐述诱导凋亡的分子机制。 方法:采用MTT方法绘制PHI作用后PC3细胞的生长曲线；采用TUNNEL方法检测PHI对PC3细胞凋亡的影响；用蛋白免疫印迹法(Western Blot)观察PC3细胞凋亡相关蛋白BcL-2，caspase-9、caspase-3、McL-1、Cyt-C、XIAP的变化及组蛋白乙酰化H3、H4，组蛋白甲基化H3K9、H3K4水平的变化；同时研究Akt信号转导通路蛋白表达水平的变化。 结果:(1) PHI能抑制PC3细胞增殖，IC50约为20μmol/L，并能诱导PC3细胞凋亡，随作用时间延长及浓度的增加，凋亡率渐上升，呈时效及量效关系；(2)PHI下调PC3细胞BcL-2，caspase-9、caspase-3、McL-1、Cyt-C、XIAP的表达，呈时效及量效变化；(3) PHI处理3小时就可见增加PC3细胞组蛋白乙酰化H3、H4，组蛋白甲基化H3K4水平，降低甲基化H3K9水平；(4) PHI处理后3小时PC3细胞Akt信号转导通路Akt及p-Akt均未见明显变化，而作用7小时后，总蛋白Akt、mTOR、p70S6K的表达变化不明显，而磷酸化蛋白p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K均表达下降。 结论:(1) PHI可抑制PC3细胞的增殖并诱导其凋亡，可能与激活细胞内源性凋亡通路有关。(2) PHI可使组蛋白H3、H4高乙酰化，并调控组蛋白甲基化水平。(3) PHI可抑制Akt通路，从而参与了PHI抑制PC3细胞的增殖、诱导凋亡的过程。PHI是一种潜在抗前列腺癌的新药。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

前 言

第一部分PHI抑制PC3细胞增殖、诱导细胞凋亡

材料和方法

结果

讨论

第二部分PHI对PC3细胞组蛋白乙酰化H3、H4和组蛋白甲基化H3K4、H3K9状态的影响

材料和方法

结果

讨论

第三部分PHI对PC3细胞Akt信号转导通路的影响

材料和方法

结果

讨论

结 论

参考文献

致 谢

前列腺癌MTOR信号通路与表遗传学的研究进展