幼鼠内脏痛高敏感性与结肠及中枢神经系统CGRP表达的关系

摘要

目的：建立幼鼠内脏痛高敏感模型，通过检测幼鼠结肠、腰骶段脊髓背角和不同脑区(下丘脑室旁核、中缝核和前皮质扣带回)CGRP分布和表达情况，探讨脑-肠轴中CGRP异常表达在幼鼠内脏高敏感形成中的作用，深入认识小儿腹痛相关的功能性胃肠道疾病的病理生理机制，为临床采取有效防治措施和开发治疗药物提供理论依据。 方法：32只SD乳鼠按析因设计分成4组，每组8只，A1B1组：新生期予结直肠刺激(Colorectal lrritation，CD，6周龄时予结直肠扩张(Colorectal Distension，CRD)刺激；A1B2组：新生期予CI，6周龄时不予CRD刺激；A2B1组：新生期未接受CI，6周龄时予CRD刺激；A2B2组：新生未接受CI，6周龄时也未予CRD刺激。A1B1组和A1B2组乳鼠从出生第8天开始每天固定时间接受CI，每日1次，连续7d；A2B1组和A2B2组只与母鼠分离、捉拿而不行CI。随后将乳鼠常规饲养至6周龄进行下列研究：①CRD刺激下腹壁撤退反射(AWR)评分、痛阈测定和腹外斜肌放电波幅检测评价幼鼠内脏痛敏感性。②对结肠、L6～S2脊髓和不同脑区(下丘脑室旁核、中缝核和前皮质扣带回)进行CGRP免疫组化法染色，采用计算机图像分析系统进行CGRP阳性细胞数和灰度积分值半定量分析。③降结肠病理学检查。α=0.05为显著性检验标准。 结果：[1]幼鼠6周龄时，随CRD增加，A1B1组和A2B1组幼鼠AWR评分和腹外斜肌放电波幅均逐渐增加；CRD20mmHg、40mmHg、60mmHg时，A1B1组AWR评分明显高于A2B1组，CRD80mmHg时，两组AWR评分无显著差异；CRD15mmHg、30mmHg、45mmHg时，A1B1组腹外斜肌放电幅值明显高于A2B1组，CRD60mmHg、75mmHg时，两组腹外斜肌放电幅值无显著差异；A1B1组和A2B1组大鼠痛阈值分别为14.79±3.14mmHg、37.71±5.3mmHg，差异有统计学意义(F=109.4，P<0.01)；降结肠未见明显病理组织损伤。[2]新生期CI和接受伤害性CRD刺激后可导致幼鼠结肠、脊髓背角和下丘脑室旁核、前扣带回皮质、中缝核内CGRP阳性细胞数明显增加，CGRP阳性细胞灰度积分值明显降低。 结论：新生期持续CI会造成幼鼠痛阈下降，出现慢性内脏高敏感性，且没有明确的组织病理学改变；幼鼠慢性内脏痛敏感性异常可能牵涉脑-肠轴的各个环节，无论是外周结肠，还是脊髓背角和前皮质扣带回、下丘脑室旁核、中缝核，CGRP均参与了内脏痛敏感性变化：新生期CI可导致神经系统发育异常和敏化，CGRP可能作为一种神经递质参与了这种病理生理改变。

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文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略词表

声明

第一部分 幼鼠内脏高敏感性与结肠降钙素基因相关肽表达的关系

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 内脏痛高敏感性幼鼠脊髓降钙素基因相关肽表达及意义

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分 内脏痛高敏感性幼鼠不同脑区降钙素基因相关肽表达及意义

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

结论

致谢

综述 新生期母婴分离对心理行为的影响及相关机制的研究进展

附录 攻读硕士学位期间发表的学述论文