舒林酸对HBV X基因转染的人肝癌SMMC7721细胞系Wnt信号通路的影响

摘要

目的：探讨非甾体类抗炎药舒林酸(Sulindac)对乙型肝炎病毒(HBV)X基因转染的人肝癌SMMC7721细胞系Wnt信号通路的影响。
　　 方法：用脂质体转染方法将HBx真核表达载体pcDNA3-X瞬时转染SMMC7721细胞(7721/HBx)，以转染空载体pcDNA3的SMMC7721细胞组(7721/pcDNA3)及未转染质粒的SMMC7721细胞组(7721)为对照，于转染后72h用RT-PCR和Western blot检测HBx的表达；并以各种浓度的舒林酸于瞬时转染后24h干预7721/HBx组和7721/pcDNA3组至72h，Western blot和免疫细胞化学检测β-catenin的表达，Western blot检测cyclinD1的表达。
　　 结果：RT-PCR和Western blot显示，7721/HBx组在RNA及蛋白水平均有HBx的表达，而7721/pcDNA3组及7721组均无表达。与7721/pcDNA3组及7721组相比，Western blot示7721/HBx组β-catenin、cyclinD1的表达水平较高，免疫细胞化学示7721/HBx组β-catenin的表达水平较高，核染色较深，而7721/pcDNA3组及7721组之间则无明显差异。Western blot和免疫细胞化学示一定浓度的舒林酸干预7721/HBx组和7721/pcDNA3组细胞48h后可下调β-catenin和cyclinD1的表达，而对7721/HBx组的下调较7721/pcDNA3组明显。
　　 结论：HBx基因成功瞬时转染入SMMC7721细胞，激活Wnt信号通路，并同时上调cyclinD1的表达。舒林酸可通过下调β-catenin抑制肝癌细胞的Wnt信号通路，下调cyclinD1的表达，且HBx阳性的肝癌细胞对舒林酸较敏感。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

第一部分 HBV X基因真核表达载体在人肝癌SMMC7721细胞系中的瞬时转染

1 实验材料和仪器

2、实验方法

3、实验结果

4　讨论

第二部分 HBV X基因的表达载体转染对人肝癌SMMC7721细胞系Wnt信号通路的影响

1实验材料和仪器

2实验方法

3实验结果

4.讨论

第三部分 舒林酸对HBV X基因转染的人肝癌SMMC7721细胞系Wnt信号通路的影响

1实验材料和仪器

2实验方法

3实验结果

4讨论

结论

参考文献

致谢

综述:Wnt信号通路与肝细胞癌