超声监测下不同方式复灌/再缺血后处理对兔睾丸完全扭转复位损伤的影响

摘要

目的：探讨不同方式的间隔缺血后处理对急性单侧睾丸完全扭转复位损伤的影响和相关机制，评价超声技术在睾丸完全扭转当时及术后的运用价值。
　　 方法：78只成年健康新西兰大白兔随机分成：对照组（假手术组/S组）；A组（A0、A1、A2、A3）；B组（B0、B1、B2、B3）；C组（C0、C1、C2、C3），每组6只,选择左侧睾丸进行扭转手术，分别将A、B、C组兔左侧睾丸血流完全阻断2h、4h、6h。达到相应缺血时间后解除结扎，血流出现即刻，A0、B0、C0组不进行任何处理；A1、B1、C1组行复灌15s/缺血15s，反复3次, A2、B2、C2组行复灌30s/缺血30s, 反复3次，A3、B3、C3组行复灌45s/缺血45s，反复3次。术前及再灌注后3天分别进行双侧睾丸超声造影，分析各组造影参数β、TTP、PBD、DT/2变化。再灌注后，经标准饲养3天，切除术侧睾丸，观察组织切片光镜下病理变化（HE染色），进行Johnsen’s评分，电镜下观察超微结构变化，检测睾丸组织MDA含量及SOD活性，Western blot检测睾丸生精上皮细胞中Caspase-3、Bcl-2的表达情况，Tunel法检测细胞凋亡指数（AI），并对各组进行对比研究。
　　 结果：术前各组术侧睾丸超声造影参数与对照组间无显著差别（P>0.05）。再灌注3天后，A组各小组间及与S组间各造影参数无显著差别（P>0.05），B组术侧睾丸DT/2较S组均显著延长（P>0.05），B1、B2组PBD较S组升高（P<0.05），B0、B3组PBD与S组无显著差别（P>0.05），C组术侧睾丸造影有不同程度的充盈缺损，感兴趣区内造影曲线近似一条直线。睾丸组织MDA含量随缺血程度加重而升高，SOD活性随缺血程度加重而降低，与S组均有显著差别（P<0.05），两者变化是一致的，A3组MDA含量较A组其它小组显著升高（P<0.05），SOD活性较A组其它小组显著下降（P<0.05），B1、B2组MDA含量显著低于B0、B3组，SOD活性显著高于B0、B3组，差别均有统计学意义（P<0.05），C组各小组间MDA含量、SOD活性均无显著差别（P>0.05）。光镜下，随缺血时间的延长Johnsen’s评分逐渐下降，A0、A1、A2组Johnsen’s评分无显著差别（P>0.05），并且均显著高于A3组（P<0.05）,B1、B2组间Johnsen’s评分无显著差别（P>0.05），并且均显著高于B0、B3组（P<0.05），B0组Johnsen’s评分显著高于B3组（P<0.05），C组各小组间Johnsen’s评分无显著差别（P>0.05）。电镜下，随缺血时间的延长各级生精细胞损伤呈现明显的程度差别。Tunel凋亡指数检测，A3组AI最高（P<0.05），A0、A1组AI无显著差别（P>0.05），A2组AI略高于A0、A1组（P<0.05）,B1、B2组凋亡指数明显低于B0、B3组（P<0.05）,B1凋亡指数略低于B2组，差别有统计学意义（P<0.05）、B0、B3组间差别无统计学意义（P>0.05）；C1、C2组凋亡指数明显低于C0、C3组（P<0.05），且C1组低于C2组，差别有统计学意义（P<0.05）。Western blot 检测，A3组术侧睾丸caspase-3表达较A组其它亚组有轻微上调（P<0.05），B1、B2组中caspase-3的表达较B0、B3组明显下降（P<0.05），但仍高于对照组，C组caspase-3表达较对照组显著上调（P<0.05），Bcl-2仅于对照组及A组中观察到少量表达，且各组间与对照组无显著差别（P>0.05）；
　　 结论：①彩色多普勒超声可对急性睾丸完全扭转做出准确的诊断，超声造影时间-强度曲线可间接反应复位后睾丸内微循环状态情况，对复位后的效果进行评价，指导下一步的治疗；②缺血后处理可明显减轻睾丸再灌注损伤导致的生殖细胞大量凋亡；③缺血后处理措施抗凋亡的分子保护机制可能是通过减少ROS生成使得caspase-3表达下调，从而减少凋亡发生；④缺血后处理的保护效应与缺血时间、实施的具体方式有一定的关系；⑤随缺血时间的延长再灌注损伤更突出，无复流现象也随之增加。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述：睾丸缺血再灌注损伤的机制及防治的进展

致谢