腹泻型肠易激综合征患者升结肠粘膜类胰蛋白酶对大鼠脊神经元[Ca2+]i的影响

摘要

目的：测定腹泻型肠易激综合征(diarrhea-predominant irritable bowel syndrome，IBS-D)患者升结肠粘膜类胰蛋白酶含量、及其对大鼠背根神经节神经元(dorsAlroot ganglion neuron，DRGn) [Ca2+]I的影响，探讨类胰蛋白酶在IBS-D发病机制中的作用。
　　 方法：获取20例符合Rome Ⅲ标准IBS-D患者、10例健康志愿者的升结肠粘膜活检组织孵育上清液(CMCS)，并测定其类胰蛋白酶含量(ELISA法)。分离、原代培养SD胚胎鼠DRGn，并将其分为8个处理组：健康志愿者CMCS(A组)；IBS-D患者CMCS(B组)；IBS-D患者CMCS＋丝氨酸蛋白酶抑制剂Fut-175(C组)；PAR-2抑制剂预培养DRGn+IBS-D患者CMCS(D组)；类胰蛋白酶0.42ng(E组)；类胰蛋白酶0.73ng(F组)；类胰蛋白酶0.73ng+Fut-175(G组)；PAR-2抑制剂预培养DRGn+类胰蛋白酶0.73ng (H组)。应用fluo-3作为[Ca2+]I示踪剂，用激光共聚焦显微镜观察处理后DRGn的[Ca2+]I变化。
　　 结果：IBS-D患者升结肠粘膜组织类胰蛋白酶浓度为(0.078±0.021) ng/mg组织，健康对照组为(0.033±0.014) ng/mg组织，差异有显著性意义(P=0.000<0.05)。
　　 A-H组的DRGn[Ca2+]I分别为：34.70±2.73，73.58±3.37，33.53±2.13，37.17±2.72，36.34±0.78，75.60±0.79，45.13±0.83，46.73±1.22，其中B组和F组的值分别高于其他各组（P均<0.05），而B组与F组间差异无统计学意义（PBF=0.712），A、C、D、E、G、H组间差异也无统计学意义（P均>0.05）。
　　 结论：IBS-D患者升结肠粘膜类胰蛋白酶量增加，类胰蛋白酶通过激活蛋白酶活化受体-2(PAR-2)促使大鼠DRGn钙信号释放，这可能参与了IBS-D患者内脏高敏感性的发生。

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文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略语

声明

前 言

第一部分：大鼠背根神经节神经元的分离和培养

第二部分:类胰蛋白酶对大鼠脊神经元[Ca2+]I的影响

结 论

参考文献

致 谢

综述 肠易激综合征内脏高敏感性发生机制中相关受体的作用