IL-1RⅡ重组质粒导入对大鼠实验性自身免疫性心肌炎的治疗作用

摘要

目的:评估编码Ⅱ型白介素-1受体（typeⅡ interleukin-1 receptor，IL-1RⅡ）的重组质粒在大鼠实验性自身免疫性心肌炎(experimental autoimmune myocarditis，EAM)中的治疗效果。
　　方法:将猪心室肌球蛋白与等体积完全弗氏免疫佐剂充分混匀后，于第0天Lewis大鼠双后足皮下注射制作EAM模型，第6天应用流体动力学方法进行重组质粒IL-1RⅡ的体内导入，第17天进行大鼠心脏超声检查后，处死大鼠，检测大鼠心/体重比值、心脏病理学评估及心肌炎面积率，进一步应用实时荧光定量RT-PCR检测心衰标记物脑钠尿肽(brain natriuretic peptide，BNP)的水平。同时检测白介素-1（Interleukin-1，IL-1)相关因子白介素-1β（Interleukin-1beta，IL-1β)、前列腺素E2合成酶（prostaglandin E2 synthase, PGEs）以及单核细胞趋化蛋白-1（Monocyte chemotactic protein1,MCP-1）的mRNA及蛋白表达水平。
　　结果：IL-1RⅡ重组质粒导入后次日表达量最高，且升高持续实验整个过程至第17天。 IL-1RⅡ基因治疗组的大鼠心/体重比值、心肌炎面积率、BNP及IL-1相关炎症因子表达均较对照组有明显下降，大鼠左室心功能亦有明显改善。
　　结论：应用流体动力学方法进行重组质粒IL-1RⅡ的体内导入治疗，对大鼠实验性自身免疫性心肌炎有改善左室功能和阻止心肌损害作用。

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前言

材料与试剂

1.动物模型的构建

2.重组质粒的构建及导入

3.组织病理学检测试剂

4.免疫印迹法检测试剂

5.普通PCR、Realtime quantitativeRT-PCR实验试剂

6．主要实验仪器

7. 主要实验试剂的配制

实验方法

1.EAM大鼠模型的构建

2．质粒构建及导入

3. 超声心动图评估

4. 病理学评估

5 . 实时荧光定量RT-PCR检测心肌组织BNP及IL-1相关炎症因子基因表达

6.Western blot检测心肌组织IL-1β、PGEs、MCP-1蛋白表达

7. 统计学分析

结果

1. 重组质粒IL-1 RⅡ的构建及鉴定

2 .重组质粒IL-1RⅡ注射后在肝脏中的mR NA表达及在心肌中的蛋白表达

3. 心肌组织病理学评估

4. 超声心动图评估

5 .心肌组织BN P及炎症因子的mRNA水平

6．心肌组织炎性因子的蛋白水平

讨论

结论

参考文献（1 ）

综述

参考文献 （2）

致谢