单侧隐睾儿童睾丸鞘膜、引带中INSL3和LGR8的表达

摘要

目的：隐睾症是人类男性生殖系统先天性畸形中最常见疾病之一，发病率较高，在足月新生男婴为3.4％～5.8％，远期主要并发症包括：成年后不育和睾丸癌发生率增加。因此，深入隐睾症的病因及发病机理成为当今男科学的焦点之一。国内外的小鼠实验认为INSL3和LGR8是睾丸引带生长发育的主要调控因子，在睾丸下降过程中起决定作用。本实验研究单侧隐睾儿童睾丸鞘膜、引带中INSL3和LGR8的mRNA表达情况，进一步揭示INSL3、LGR8与人类隐睾发病的相关性。
　　方法：采用RT-PCR技术，分别检测INSL3和LGR8在42例单侧隐睾儿童的隐睾鞘膜、隐睾引带和40例单侧睾丸鞘膜积液儿童的睾丸鞘膜的mRNA表达情况。
　　结果：①隐睾鞘膜和对照组睾丸鞘膜2组均有INSL3 mRNA和LGR8 mRNA表达，INSL3和LGR8在隐睾鞘膜中的mRNA表达水平低于睾丸鞘膜的mRNA表达(P<0.05)。提示隐睾患者生殖系统组织中的INSL3和LGR8的mRNA表达整体水平可能偏低。
　　②隐睾引带和隐睾鞘膜2组均有INSL3 mRNA和LGR8 mRNA表达，INSL3和LGR8在隐睾引带中的mRNA表达水平低于隐睾鞘膜的mRNA表达(P<0.05)。提示隐睾症的睾丸周围组织（鞘膜、引带等）INSL3和LGR8异常低表达可能是人类隐睾症的发病原因之一。
　　结论：隐睾症儿童的睾丸周围组织（鞘膜、引带等）INSL3和LGR8呈现低表达，与动物实验结果一致，提示可能与男性生殖系统分化不全--隐睾症的发生有关。

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第一章 前言

第二章 实验材料与方法

1 材料

1.1 标本来源

1.2 仪器与设备

1.3 耗材

1.4 试剂

2 实验方法

2.1 引物设计、合成

2.2 实验前准备

2.3 TRIzol法提取总RNA

2.4 RNA逆转录合成cDNA

2.5 PCR

2.6 1%琼脂糖凝胶电泳

第三章 结果

1 半定量RT-PCR检测隐睾鞘膜和睾丸鞘膜中INSL3 mRN A及LG R8 mRNA

2 半定量RT-PCR检测隐睾引带和隐睾鞘膜中INSL3 mRN A及LG R8 mRNA

第四章 讨论

1 睾丸引带的胚胎学

2 INSL3和LGR8在睾丸下降过程中的作用

2．1 INSL3的结构、分布与表达

2.2 LGR8的结构、分布与表达

2.3 INSL3和LGR8的信息传递

2.4 INSL3和LGR8调控睾丸下降

3 人类的INSL3与LGR8研究

3.1 INSL3基因突变

3.2 LGR8基因突变

4 实验意义、心得和展望

4．1 隐睾症睾丸鞘膜、引带INSL3和LGR8的表达和意义

4.2 实验心得：关于标本和参照的选择

4.3 下一步实验展望

第五章 结论

参考文献

综述文章

参考文献

攻读学位期间发表论文情况

致谢