经照射的单倍体相合供者淋巴细胞输注抗小鼠黑色素瘤的效应研究

摘要

目的：供者淋巴细胞输注（DLI）作为一种过继细胞免疫治疗（ACI）重要手段，常与造血干细胞移植联合，已被用于治疗血液系统恶性肿瘤和某些实体瘤，本研究在CB6F1小鼠→CC3HF1小鼠(F1→F1)输注模型中，探讨了单倍体相合供者淋巴细胞输注的抗小鼠黑色素瘤效应及其相关机制。
　　方法：建立F1-F1单倍体相合输注模型，以皮下接种B16-F10黑色素瘤细胞的CB6F1小鼠（表型为H-2b/d）为受者鼠，以CC3HF1小鼠（表型为H-2d/k）为供者鼠。分为4组：PBS组：尾静脉注射PBS；CTX组：环磷酰胺（cyclophosphamide, CTX）化疗+尾静脉注射PBS；CTX+T细胞组：CTX化疗+输注经照射供者鼠脾细胞中的T细胞部分；CTX+脾细胞组：C TX化疗+输注经照射供者鼠脾细胞。观察各组小鼠的肿瘤体积、体重、生存时间、瘤重等；检测受者鼠体内的供者淋巴细胞存活情况、淋巴细胞亚群细胞的数量变化；LDH法检测宿主对肿瘤细胞的杀伤能力；ELISA法检测宿主血清中IFN-γ、IL-2浓度变化，观察各DLI组小鼠有无GVHD（移植物抗宿主病）临床症状及重要脏器的病理学变化。
　　结果：在肿瘤体积、中位生存时间、瘤重上，P BS组与C TX组相比无统计学差异，CTX+T细胞组与 CTX+脾细胞组相比也无显著差异（P>0.05）；各 DLI组的肿瘤体积小于PBS组（8.07±1.66cm3、8.24±1.45cm3 vs.10.84±1.11cm3， P<0.05），瘤重也小于PBS组（8.19±0.82g、7.62±0.94 g v s.12.38±2.73g，P<0.05），小鼠中位生存时间长于PBS组（31±3.286d、36±2.191d v s.19±0.548d，P<0.05）。各DLI组均未出现明显GVHD。各DLI组的供者淋巴细胞于输注后5天内消失，但在输注后第10天，宿主脾细胞仍对肿瘤细胞有较强的杀伤作用。各DLI组可有效增加细胞因子（IL-2、IFN-γ）的分泌，增加CD8+T细胞和NK细胞的数量。
　　结论：低剂量CTX化疗联合经照射的单倍体相合 DLI可获得较好的抗小鼠黑色素瘤作用；DLI可诱发宿主抗肿瘤（HVT效应，使C D8+T、NK细胞数量明显升高，增加了细胞因子（IL-2、IFN-γ）的分泌，供者T淋巴细胞在诱发HVT效应中发挥主要作用。

目录

封面

声明

目录

缩略词表

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分CB6F1小鼠B16-F10黑色素瘤皮下种植瘤模型的建立

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

第二部分 经照射单倍体相合供者淋巴细胞输注抗小鼠黑色素瘤的作用

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

致谢

过继细胞免疫治疗的研究进展

1. ACI的概念

2. ACI分类

3. ACI的应用

4. 结语

参考文献