内质网应激在对比剂诱导的人肾小管上皮细胞凋亡中的作用及阿托伐他汀对其的保护作用

摘要

目的：
　　探讨内质网应激（ERS）在对比剂（CM）诱导人肾小管上皮细胞（HKC）凋亡中的作用及阿托伐他汀（ATO）对其的保护作用。
　　方法：
　　以HKC为研究对象，在ATO预处理及缺血缺氧条件下，将细胞株随机分为六组：空白组、CM组（加入120mgI/mL碘普罗胺预处理2h）、抗凋亡剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（加入10mmol/L NAC预处理2h，再加120mgI/mL碘普罗胺处理2h）、ATO低、中、高剂量组（分别加入10-8、10-7、10-6mol/L的ATO预处理后再加120mgI/mL碘普罗胺处理2h），在预先设定的处理条件下将6组细胞进行培养。此后，用细胞计数试剂-8法（CCK-8）检测细胞增殖情况，乳酸脱氢酶（LDH）检测细胞损伤，全自动生化分析仪检测细胞内和培养液中髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平，流式细胞术检测细胞凋亡，蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞中GPR78、CHOP和caspase-12的蛋白表达水平，实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测细胞中GPR78、CHOP和caspase-12的mRNA表达水平。
　　结果：
　　CM可明显降低细胞活性并造成正常HKC细胞和缺血缺氧HKC细胞的损伤，引起细胞内MPO、MDA减少，细胞外SOD增多。ATO可提高细胞活性并减轻细胞损伤，引起细胞内MPO、MDA增多，细胞外SOD减少。其中ATO对缺血缺氧HKC细胞的影响较为明显，且呈现明显的剂量依赖性。CM明显增加了GPR78、CHOP和caspase-12的蛋白表达和细胞凋亡率，抗凋亡剂NAC明显降低了caspase-12的表达和细胞凋亡率，但不能明显降低对比剂诱导的GPR78和CHOP高表达。ATO预处理可降低GPR78、CHOP和caspase-12的表达，且呈现明显的剂量依赖性，从而起到对HKC的保护作用。
　　结论：
　　在缺血缺氧条件下，CM诱导HKC细胞活性下降、凋亡，此作用可能与细胞内氧化应激及内质网应激相关。阿托伐他汀对对比剂诱导的HKC细胞凋亡具有一定的保护作用，其可通过降低细胞内氧化应激、内质网应激水平来减少对比剂诱导的HKC细胞凋亡。

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2 材料

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5讨论

6结论

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综述: 对比剂急性肾损害及抗氧化剂对其预防的研究进展

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