16SrRNA双检荧光定量PCR在诊断新生儿败血症的应用研究

摘要

目的：通过对比细菌革兰双检荧光定量 PCR、细菌培养在新生儿败血症诊断价值上的差异，以期获得敏感、快速、准确的病原学检测方法。
　　方法：以临床常见菌16S rRNA基因为靶序列，在高度保守区设计通用引物、革兰阳性和阴性分型探针，建立细菌革兰阴、阳性菌双通道荧光定量PCR检测体系。收集福建省妇幼保健院新生儿科2016年2月到2017年1月疑似细菌感染的新生儿的无菌体液标本(血液、脑脊液、腹水)2份，其中一份行细菌培养检测，另一份统一经过DNA提取，行细菌双荧光定量PCR检测，检测结果进行统计学分析。
　　结果：
　　1.在304例临床标本中，血液标本254例，脑脊液标本45例，腹水标本5例。细菌革兰双检荧光定量 PCR共检出59例阳性标本，阳性率为19.41%（59/304）；细菌培养共检出44例，阳性率为14.47%（44/304），细菌双荧光定量PCR阳性率高于细菌培养阳性率，差异有统计学意义P<0.05。
　　2.细菌革兰双检荧光定量PCR检测敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为81.8%、91.2%、61.0%、96.7%。
　　3.细菌革兰双检荧光定量 PCR在鉴别革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌感染中，敏感度差异明显(73.9%VS90.5%)，但特异度、阳性预测值、阴性预测值差异不大。
　　结论：细菌革兰双检荧光定量PCR在早期识别细菌感染、鉴别细菌革兰氏分型及排除细菌感染都有重要的临床应用价值。

目录

声明

英文缩略词表

前言

资料及方法

1.研究对象

2.纳入标准及排除标准

3.主要试剂及仪器

4.实验步骤

5.统计分析

结果

1. 细菌革兰双检荧光定量PCR的特异性

2. 细菌革兰双检荧光定量PCR扩增的敏感性

3. 临床标本细菌革兰双检荧光定量PCR与细菌培养结果

4. 细菌革兰双检荧光定量PCR评价指标

讨论

1.敏感度分析

2.特异度和阴性预测值分析

3.阳性预测值分析

4.细菌革兰双检荧光定量PCR鉴定革兰分型分析

5.细菌革兰双检荧光定量PCR临床实践分析

本研究的局限性

结论

参考文献

综述:16S rRNA基因在新生儿感染性疾病上的应用

致谢