硬化性萎缩性苔藓与硬皮病的多光子成像研究

摘要

目的：研究多光子显微成像技术作为一种新型、无创、便捷的皮肤病诊断方法，运用于硬化性萎缩性苔藓与硬皮病诊断与鉴别的可行性。
　　内容：多光子显微成像技术具有分辨率高、穿透深度深、二维显像等特点，能够对人体皮肤病损进行在体、无创、动态、重复观察，它是利用人体组织的内源性信号进行成像，如人体角蛋白、细胞质、核仁、弹性纤维、胶原纤维、细胞间基质可发出TPEF信号，显示为红色图像；胶原纤维又可发出SHG信号，显示为绿色图像；而细胞核、血管管腔不发出荧光信号。本实验通过TPEF/SHG图像可清楚地显示出皮肤角质层、表皮层、真皮乳突、毛细血管、胶原纤维和弹性纤维等组织图像，便于临床医师掌握，有助于皮肤病的诊断、病情评估及治疗指导。鉴于该技术在皮肤病临床诊断和组织形态学研究中的优势，我们将多光子显微镜应用到临床常见的两种皮肤病硬化性萎缩性苔藓与硬皮病的诊断与鉴别中。
　　方法：本实验利用多光子显微镜对硬化性萎缩性苔藓及硬皮病病变皮肤石蜡切片进行成像，获得具有高分辨率、高对比度的TPEF/SHG图像，进而描述两种皮肤病组织特征及二者间的区别。并定义了胶原束方向比（OICB），使用ImageJ软件的FFT转换功能测量计算得到OICB值，来定量评估其组织形态学上的差别。
　　结果：依据 TPEF/SHG图像所示，组织形态学上，硬化性萎缩性苔藓病变皮肤可见空泡化变性的基底细胞、角质栓、皮下大疱等结构，真皮浅层纤维多有断裂、破碎、变性，真皮深层大量螺旋状胶原纤维与波浪状弹性纤维彼此缠绕平行排列；硬皮病病变处的皮肤表皮基底层有变平坦趋势，真皮浅层纤维组织部分断裂、破碎，失去正常线状或波浪状结构，真皮深层弹性纤维起伏幅度变小，胶原纤维明显变粗，纤维组织大致平行分布。另外统计学分析得，硬化性萎缩性苔藓和硬皮病病变皮肤真皮浅层OICB值相比时，数据存在明显统计学差异，而真皮深层OICB值对比时，数据无统计学意义。
　　结论：本次实验结果示，多光子显微成像技术能够从组织形态学上鉴别硬化性萎缩性苔藓和硬皮病。可预见未来此技术将可为这两种皮肤病的无创诊断与鉴别诊断提供有力的实验室依据。

目录

声明

附录

前言

材料和方法

1实验样品

2实验器材与原理

3图像处理与数据分析

3.1图像处理

3.2数据分析

结果

1硬化性萎缩性苔藓病变皮肤的TPEF/SHG图像

2硬皮病病变皮肤的TPEF/SHG图像

3硬化性萎缩性苔藓与硬皮病的OICB值

3.1硬化性萎缩性苔藓与硬皮病真皮浅层OICB值

3.2 硬化性萎缩性苔藓与硬皮病真皮深层OICB值

讨论

结论

参考文献

综述:巨噬细胞在硬皮病发病机制中的研究进展

致谢