姜黄素衍生物L3和0818对大鼠类风湿性关节炎的治疗作用及其机制研究

摘要

类风湿性关节炎是一种全身系统自身免疫性疾病，其发病机制复杂，造成机体损害甚至致残。目前有非甾体类药物、慢作用抗风湿药、糖皮质激素、生物制剂和天然药物，由于前4类药物的不良反应大，天然药物成为治疗研究热点。姜黄素是姜科植物姜黄的主要活性成分之一，具有抗炎症、抗氧化、抗肿瘤等药理活性。其作用途径广，毒副作用小，能够通过多条信号传导途径，抑制类风湿性关节炎的炎症反应，实现治疗目的。本文以姜黄素衍生物L3和0818作为研究对象，探讨它们用于类风湿性关节炎的前景，并提供药理学依据。
　　目的：观察L3和0818对小鼠急、慢性炎症的影响及全身性炎症反应综合征的保护作用，以及对佐剂性关节炎和胶原诱导性关节炎的治疗效果，并通过体外实验研究药物抗炎、抗氧化机制，通过研究药物对RA发病相关信号通路及关键细胞因子的影响，探讨可能的作用靶点和机理。
　　方法：⑴对二甲苯诱发小鼠耳廓肿胀的影响；⑵对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响；⑶对滤纸片引起小鼠肉芽组织增生的影响；⑷对热灭活菌液注射引起小鼠全身性炎症反应综合征的保护作用；⑸对LPS刺激RAW246.7细胞后NF-κB和Nrf2信号通路的影响；⑹通过足肿胀、关节病理检查等观察对佐剂性关节炎模型大鼠的影响；⑺检测胶原诱导性关节炎模型大鼠血清NO、MDA、SOD、TNF-α、IL-1β、IL-6和组织中PGE2的含量，免疫印迹法检测组织中COX-2、iNOS蛋白表达；⑻荧光定量PCR检测FLS细胞MMP1、MMP3、TIMP1、p38 MARK、Erk1、Erk2、JNK1、JNK2 mRNA表达情况，免疫印迹法检测FLS细胞p-Raf、p-p38、p-MEK、P-ERK蛋白含量。
　　结果：①两种姜黄素衍生物对二甲苯诱发的小鼠耳廓肿胀均有明显的抑制作用；②对角叉菜胶所致的小鼠足趾肿胀均有明显的抑制作用；③对滤纸片引起小鼠的肉芽组织增生均有抑制作用；④明显减少全身性炎症反应综合征小鼠血清NO、MDA含量，提高SOD水平，明显降低血清ALT和AST含量，改善病理损伤表现；⑤抑制LPS刺激引起的NF-κB(p65)核转移，且诱导Nrf2、HO-1蛋白的表达。⑥药物对佐剂性关节炎原发性、激发性足肿胀均有抑制作用，病理检查显示炎性细胞浸润，滑膜增生现象明显减少；⑦药物对胶原诱导性关节炎足部肿胀有抑制作用，减少 NO、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6和PGE2含量，提高SOD水平，降低组织内COX-2和iNOS水平；⑧荧光定量PCR检测显示药物下调p38 mRNA的相对表达量，对 MEK1/2、ERK1/2、MMP1、MMP3和TIMP1mRNA的表达未见明显改变；免疫印迹法显示药物处理后p-Raf、p-p38、p-MEK、P-ERK蛋白含量均有明显下调。
　　结论：证明姜黄素衍生物L3和0818能有效治疗大鼠类风湿性关节炎。这两种药物的抗炎、抗氧化机制可能是通过抑制NF-κB通路，减少TNF-α、IL-1β、IL-6含量，降低组织内COX-2表达，减少PGE2含量，阻滞炎症反应和血管翳形成，并影响 Ras→Raf→MEK→ERK通路及 p38途径的磷酸化环节，从而发挥抗炎活性；同时活化Nrf2/ARE通路，降低组织内iNOS表达，减少血清NO、MDA含量，提高SOD水平，来实现抗氧化作用。

目录

声明

英文缩略词表

前言

第一部分姜黄素衍生物L3和0818的抗炎、抗氧化活性研究

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分姜黄素衍生物L3和0818对大鼠关节炎模型的治疗效果研究

材料与方法

结果

讨论

小结

结论

参考文献

综述：姜黄素治疗类风湿性关节炎的作用机制

致谢