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利用嵌合体组织重组技术进行人类牙齿再生的研究

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摘要

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第1章绪论

第2章实验内容

结论

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摘要

目前人类牙齿的缺陷或缺失是普遍的现象,利用嵌合体组织重组技术进行人类牙齿再生的研究,其最终目的是探讨人牙髓干细胞的成牙潜能,并初步建立体外再生人类牙齿结构的技术模型,为利用人类自身的干细胞在体外再生出可移植的牙胚或牙齿的进一步研究奠定理论和技术基础。 本研究利用体外细胞培养的方法分离、培养儿童的乳牙牙髓干细胞(SHED)和成人的第三磨牙牙髓干细胞(DPSCs),并通过组织重组、器官培养及组织形态学分析等方法,研究人牙髓干细胞的成牙潜能。主要内容及结论如下:1、将SHED或DPSCs与鼠E10.5非牙源性上皮重组制备嵌合体,发现人牙髓干细胞不能诱导非牙源性上皮形成牙齿结构,说明SHED或DPSCs不具有诱导牙齿发育的能力;2、将SHED或DPSCs与鼠E10.5有诱导成牙能力的牙上皮重组制备嵌合体,并对不同发育时期-的重组组织块进行形态学分析,没有观察到早期牙胚或牙齿结构的形成,表明SHED或DPSCs不能直接被有诱导成牙能力的牙上皮诱导成牙;3、用有诱导成牙能力的鼠源磨牙牙胚间充质细胞与SHED或DPSCs混合后制备嵌合体,发现在E13.5鼠源磨牙牙胚间充质细胞存在的条件下,SHED或:DPSCs能被鼠源牙上皮诱导形成牙齿结构,说明SHED或DPSCs在体外可间接被诱导成牙;4、制备SHED或DPSCs与鼠E10.5牙源性上皮重组的嵌合体,在体外联合外源生长因子(BMP-4或FGF-8)的诱导,发现在BMP-4或FGF-8的作用下,鼠牙源性上皮能够诱导人牙髓干细胞形成牙齿结构,表明在外源生长因子的辅助作用下,SHED或DPSCs能够被鼠牙源性上皮诱导成牙。我们通过以上的研究,最终在体外初步建立了利用人牙髓干细胞进行再生人类牙齿结构的技术。

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