马铃薯脱毒和试管微型薯诱导技术

摘要

以卷叶和花叶病毒病发生严重的马铃薯品种克新3号和德友1号为材料,以茎尖为外植体进行组织培养脱毒研究,初步建立了一套集茎尖培养,病毒检测和试管微型薯诱导为一体的技术体系.主要结果如下:1.取带2个叶原基(长度约为0.2-0.5mm)的茎尖为外植体,在附加6-BA、IAA和NAA的MS培养基上进行3个月的培养,成苗率达30﹪以上.另外,在切取茎尖前对薯苗热疗(37℃)4周,在基本不影响成苗率的同时,可大幅度提高脱毒率.2.在MS固体基本培养基上进行继代增殖培养,不易污染,但植株长势较弱,采用棉纤维为载体的液体MS基本培养基可以壮苗,并提高增殖效率.3.利用带封口膜的150ml的三角瓶进行液体培养,并采取添加矮壮素,改变光照强度等措施,有效解决了试管苗长势太弱而影响微型薯产量的问题.4.在培养基中添3-5mg/L的6-BA或500mg/L的CCC,每天光照8小时,暗处理16小时,可以显著提高试管薯的产量.5.将8cm左右高的脱毒苗在20℃下揭盖放置2天,然后假植于以沙子为基质的花盆中,成活率达95﹪以上.

目录

前言

1材料与方法

1.1马铃薯脱毒苗的组织培养

1.1.1供试材料

1.1.2消毒剂及消毒方法的选择

1.1.3用正交设计筛选培养基配方

1.1.4茎尖大小对脱毒效果的影响

1.1.5热疗对脱毒效果的影响

1.1.6试管苗壮苗培育的试验

1.2马铃薯脱毒的DAS-ELISA检测

1.2.1加入包被抗体

1.2.2加入待测样品

1.2.3加入酶标抗体

1.2.4加入底物

1.2.5结果判断标准

1.3用马铃薯脱毒苗诱导试管微型薯

1.3.1不同培养基配方对试管微型薯诱导效果的比较

1.3.2不同光照时数对试管微型薯形成的影响

1.3.3不同温度对试管薯形成的影响

2.结果与分析

2.1马铃薯脱毒苗的组织培养

2.1.1消毒试剂与消毒方法的选择

2.1.2不同培养基配方的筛选

2.1.3茎尖大小对脱毒效果的影响

2.1.4热疗对脱毒效果的影响

2.1.5试管苗壮苗培育的试验

2.2马铃薯脱毒苗的DAS-ELISA检测

2.3用马铃薯脱毒苗诱导试管微型薯

2.3.1不同培养基对试管微型薯形成的影响

2.3.2不同光照对试管微型薯形成的影响

2.3.3不同温度对试管微型薯形成的影响

3.讨论

参考文献

附录1

附录2

致谢