肾叶天胡荽挥发油提取、成分分析及杀虫活性研究

摘要

肾叶天胡荽(Hydrocotyle wilfordi Maxim.)为伞形花科天胡荽亚科植物，在我国分布广泛，资源丰富。本文对肾叶天胡荽的基本化学成分进行初步分析，利用水蒸气蒸馏法、系统溶剂提取法获得肾叶天胡荽不同的提取物，并对其杀虫活性及作用方式进行初步研究，筛选出具有较高杀虫活性的提取物。采用超临界CO2萃取法提取挥发油，通过单因素试验和正交试验优化提取条件，并对水蒸气蒸馏法、溶剂萃取法、超临界CO2萃取法获得的挥发油进行成分对比分析及杀虫活性对比研究，最后测定其主要成分雪松醇的杀虫活性及粗茶皂素对雪松醇的杀虫增效作用。 对肾叶天胡荽不同提取物杀虫活性初步研究结果显示：挥发油的杀虫作用效果最理想，对大豆蚜虫的杀虫作用方式主要为触杀作用，而对白蚁主要为熏蒸作用。 采用单因素试验和正交试验优化超临界CO2萃取肾叶天胡荽挥发油的结果表明：粒度为60-80目，萃取压力为35 MPa，萃取温度为50℃，解析压力为5 MPa，解析温度为40℃，萃取时间为75 min，CO2流量为34-36 L·h-1是较佳工艺条件，超临界CO2萃取肾叶天胡荽挥发油的得率高达5.32％。 采用不同的提取方法获得的挥发油的成分分析结果显示：水蒸气蒸馏法提取的挥发油共鉴定出32种成分，主要包括萜类及烯醇类化合物，其中成分含量较高的有雪松醇(45.669％)、3，7，7-三聚体，二甲基，[1S]环[4，1，0]庚-3-烯(19.344％)、石竹烯氧化物(10.702％)；溶剂萃取法提取的挥发油共鉴定出38种成分，主要包括长链烷烃类、酚类、烯醇类及酯类化合物，其中成分含量较高的有2，4-双(1，1-二甲基乙基)苯酚(29.644％)、雪松醇(14.512％)、邻苯二甲酸二异丁酯(12.061％)、石竹烯氧化物(5.665％)、丁酸乙酯(4.943％)；超临界CO2萃取的挥发油共鉴定出19种成分，其中还含有相当一部分非挥发性物质，主要包括长链烷烃类、烯醇类及酯类化合物，其中成分含量较高的有邻苯二甲酸二辛酯(64.302％)、2，2’-亚甲基双[6-(1，1-二甲基乙基)-4-甲基]苯酚(7.783％)、2，3，4-三甲基-2-戊烯(2.304％)。 不同提取方法获得的挥发油进行杀虫活性的对比研究表明：随着浓度的增加，大豆蚜虫和白蚁的死亡率也有所提高。水蒸气蒸馏法提取的挥发油对蚜虫的触杀作用及对白蚁的熏蒸作用效果最理想，对蚜虫24 h后的触杀作用的毒力回归方程为：Y=6.1640+3.1967x(r=0.8456)，致死中浓度为0.4324 mg·mL-1；对白蚁24 h后的熏蒸作用的毒力回归方程为：Y=4.2316+2.7161x(r=0.9838)；致死中浓度为1.9183mg·mL-1。 雪松醇的杀虫活性及粗茶皂素对雪松醇增效作用研究结果显示：雪松醇对大豆蚜虫的触杀毒力的致死中浓度LC50为10.9107 mg·mL-1，而加入5 mg·mL-1和10 mg·mL-1的粗茶皂素后，雪松醇的致死中浓度LC50降低为3.0933 mg·mL-1和1.8332 mg·mL-1，表明粗茶皂素对雪松醇在大豆蚜虫的触杀活性上具有一定程度的增效作用。 本研究对野生植物天胡荽的开发和综合利用有着重要的科学意义。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

1植物源杀虫剂的研究概况

1.1杀虫植物资源研究

1.2植物源杀虫剂作用机理与方式

1.3植物源杀虫剂的优势与局限

1.4植物源杀虫剂的开发利用

2天胡荽亚科植物的研究概述

2.1天胡荽的形态特征

2.2天胡荽的化学成分研究

2.3天胡荽的生物活性研究

3选题的目的、意义

第一章 肾叶天胡荽提取物杀虫活性的初步研究

1材料与方法

1.1试验材料

1.2主要仪器

1.3试验方法

2结果与分析

2.1肾叶天胡荽基本化学成分分析

2.2肾叶天胡荽提取物的生物活性

3讨论

第二章 肾叶天胡荽挥发油的超临界CO2萃取工艺研究

1材料与方法

1.1试验材料

1.2主要仪器

1.3试验方法

2结果与分析

3结论与讨论

第三章 肾叶天胡荽挥发油化学成分分析

1材料与方法

1.1试验材料

1.2主要仪器

1.3试验方法

2结果与分析

2.1水蒸气蒸馏法提取的挥发油的GC-MS分析

2.2溶剂萃取法提取的挥发油的GC-MS分析

2.3超临界CO2萃取的挥发油的GC-MS分析

3结论与讨论

3.1提取方法的对比

3.2挥发油成分的对比

第四章 肾叶天胡荽挥发油的杀虫活性研究

1材料与方法

1.1试验材料

1.2试验方法

2结果与分析

2.1挥发油对大豆蚜虫的触杀毒力

2.2挥发油对白蚁的熏蒸毒力

3结论与讨论

3.1结论

3.2讨论

第五章 粗茶皂素对雪松醇的增效作用测定

1材料与方法

1.1试验材料

1.2试验方法

2结果与分析

2.1溶剂和乳化剂的筛选

2.2雪松醇对大豆蚜虫的触杀毒力

2.3雪松醇对白蚁的熏蒸毒力

2.4雪松醇加入粗茶皂素后对大豆蚜虫的触杀毒力

3讨论

参考文献

附录

致谢