菌草灵芝菌糠多糖对瘤胃微生物发酵及菌群的影响

摘要

本文实验设计共分为5部分：菌草灵芝菌糠多糖的提取与优化；菌草灵芝菌糠多糖对体外人工瘤胃发酵特性影响；菌草灵芝菌糠多糖对体外人工瘤胃培养微生物区系影响；菌草灵芝菌糠代替菌草对福清山羊瘤胃发酵特性及微生物菌群结构影响，旨在为菌草灵芝菌糠科学开发提供理论依据。
　　实验一：通过正交实验比较不同烘干物质（DM）比例、水浴温度和浸泡时间对菌草灵芝菌糠多糖提取率影响。共设16个处理，每个处理6个重复。结果确定菌草灵芝菌糠多糖最佳提取条件为：烘干物质与蒸馏水比例1:15，水浴温度为100℃，浸泡时间为3h，菌草灵芝菌糠多糖提取率为2.525％。
　　实验二：采用体外培养瘤胃发酵法研究添加菌草灵芝菌糠多糖5mg/kg、50mg/kg、250mg/kg及500mg/kg等4个水平，培养0h、6h、12h、18h、24h、36h及48h，对体外人工瘤胃发酵产气量、发酵液 pH值、NH3-N（氨态氮）浓度、MCP（微生物蛋白）浓度及VFA（挥发性脂肪酸）浓度等体外发酵特性的影响。结果表明，添加不同水平菌草灵芝菌糠多糖均能有效改善体外瘤胃发酵特性，其中以5mg/kg添加量效果最佳，氨态氮比对照组提高14%（P<0.01），微生物蛋白比对照组提高5%（P<0.01），挥发性脂肪酸比对照组提高31%（P<0.01）。
　　实验三：采用优化反复冻融法和CTAB法提取瘤胃体外培养液总细菌、真菌、产甲烷菌、产琥珀酸丝状杆菌、黄色瘤胃球菌及溶纤维丁酸弧菌的DNA。并应用RT-PCR（实时荧光定量）技术定量微生物DNA总量。结果表明：微生物DNA提取时间缩短12h，利用微生物特有引物进行 PCR鉴定，结果显示单一、明亮的目的条带，说明提取微生物 DNA纯度较高，可以满足实验需求。应用RT-PCR技术定量微生物数量结果表明菌草灵芝菌糠多糖使细菌总浓度对对照组提高56.5%，产甲烷菌浓度降低29.5%（P<0.01），提高纤维降解菌繁殖率。其中以菌糠灵芝多糖添加量5mg/kg为最佳。
　　实验四：选用12只体重为30~35Kg、公母各半并安装永久性瘤胃瘘管的福清山羊，随机分为实验组和对照组，对照组日粮为常规日粮，在实验组中用菌草灵芝菌糠代替20%菌草。预试期为7d，正试期为28d，在第1天、第7天、第14天、第21天、第28天晨饲前分别采集山羊瘤胃液，测定瘤胃发酵常规指标及瘤胃微生物数量。结果表明：用菌草灵芝菌糠代替20%菌草饲喂山羊，可以改善瘤胃内微生物发酵水平，提高纤维素降解率。

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前言

1菌草灵芝菌糠多糖

2 瘤胃微生物

3瘤胃微生物体外培养法

4 瘤胃微生物定量方法

实验一 菌草灵芝菌糠多糖提取方法研究与优化

1 材料与方法

2实验结果

实验二 菌草灵芝菌糠多糖体外人工瘤胃发酵特性影响

1 实验材料与方法

2 实验结果与分析

3 讨论

4小结

实验三 菌草灵芝菌糠多糖对体外人工瘤胃微生物区系影响

1 实验材料与方法

2实验结果

3 讨论

4 结论

实验四 菌草灵芝菌糠代替菌草对山羊瘤胃发酵特性的影响

1 实验材料与方法

2 实验结果与分析

3 讨论

4 结论

全文结论

参考文献

附录

致谢