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景观特征对小菜蛾种群遗传结构及基因流的影响

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1 前言

1.1小菜蛾的危害

1.2小菜蛾种群遗传学的研究

1.3景观遗传学在害虫防治中的应用

2 材料与方法

2.1研究区域的选择及样本采集

2.2研究方法

2.2.1小菜蛾基因组DNA提取

2.2.2 PCR反应

2.2.3 PCR产物电泳检测

2.2.4微卫星基因型分型

2.3微卫星数据统计分析

2.3.1种群遗传多样性分析

2.3.2种群遗传结构分析

3 结果与分析

3.1小菜蛾种群遗传多样性

3.2小菜蛾种群遗传结构

3.2.1种群遗传分化及基因流

3.2.2主坐标分析和STRUCTURE聚类分析

3.2.3分子变异来源分析(Analysis of molecular variance, AMOVA)

4 总结与讨论

4.1小菜蛾种群遗传多样性分析

4.2小菜蛾种群遗传结构和基因流的分析

5 本研究存在的不足及进一步的研究建议

参考文献

附件

致谢

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摘要

本研究以福建省永泰县、闽侯县及福清市交界处面积约为734 km2的小尺度农业景观为研究区域,结合其农业景观特征,选取了19个乡镇为采样点。在本实验室筛选出的小菜蛾微卫星引物的基础上,选取8个微卫星位点为分子标记,采用遗传变异参数分析、成对遗传分化值(pairwise Fst)分析、基因流(Nm)的计算和分析、遗传距离(Fst/(1-Fst))与地理距离(GD)的相关性分析、遗传变异来源分析(AMOVA)、STRUCTURE聚类分析以及主坐标分析(Principal Coordinates Analysis)的方法,研究河流、山脉、道路这3种景观要素对小尺度景观区域内19个小菜蛾种群(共626个个体)的遗传结构和基因流的影响。主要结果如下:
  1.小菜蛾种群的遗传多样性
  19个小菜蛾种群均显著偏离哈迪温伯格平衡(HWE)(p<0.05),大部分小菜蛾种群在位点间都符合基因连锁平衡(p>0.05)。研究区域内小菜蛾种群的遗传多样性水平整体较高,期望杂合度(He)介于0.520-0.606之间,观测杂合度(Ho)介于0.429-0.557之间,等位基因丰富度(AR)介于4.000-5.536之间。样点塘前(TQ)的种群与主山脉东侧样点的种群遗传多样性水平相当,均较高,而主山脉西侧其他种群遗传多样性水平偏低。样点TQ与主山脉东侧样点间的道路促进寄主植物十字花科蔬菜的运输,进而增强TQ的小菜蛾种群与主山脉东侧种群间的基因交流,可能是导致TQ种群遗传多样性高的原因。
  2.小菜蛾种群的遗传结构和基因流
  成对遗传分化值(pairwise Fst)的分析结果显示,19个种群间Fst值均小于0.15,表明种群遗传分化整体处于中等偏低水平;基因流(Nm)的结果显示,约84%的种群间的Nm>4,表明小菜蛾种群间存在高水平的基因流,样点SL的种群与其他种群间遗传分化相对较大,这可能与SL种群的样本采集于农户菜园中的小块菜地,蔬菜被运输很小有关;遗传距离(Fst/(1-Fst))与地理距离(GD)的相关性分析结果显示,种群间的遗传距离与地理距离不相关,地理距离不是引起种群遗传分化的主要原因;借助STRUCTURE聚类、PCoA、AMOVA分析法处理19个样点数据,结果表明,河流、山脉、道路这3种景观要素并未对小菜蛾种群的遗传变异起塑造作用,对种群间的基因交流不构成明显的阻碍作用。比较各样点遗传多样性水平的分布情况并结合其农业景观格局,在19个样点中选取位于主山脉东侧的9个种群做进一步分析,结果表明,在该尺度下,山谷内的种群(DT和XT)与山谷外的7个种群有显著遗传分化(p=0.02835),山脉会对种群间的基因交流产生显著的阻碍作用。因此,我们认为在小菜蛾景观遗传学的研究中,不同空间尺度下的景观因子对遗传分化的影响存在差异。

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