RNA沉默透明质酸酶HYAL1基因对人乳腺癌细胞恶性潜能的影响

摘要

本文第一部分应用RT-PCR探讨了SiRNA-HYAL1对人乳腺癌细胞透明质酸酶HYAL1基因表达的影响。结果表明SiRNA-HYAL1作用于人乳腺癌细胞后能特异性抑制HYAL1的mRNA的表达水平。第二部分应用细胞培养、RNA干扰技术、MTT法和流式细胞仪研究SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因对人乳腺癌细胞生长和增殖的影响。结果显示SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因后能明显抑制人乳腺癌细胞生长和增殖。第三部分研究SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因对人乳腺癌细胞侵袭潜力的影响。方法：通过体外侵袭模型，测定表达不同水平透明质酸酶的人乳腺癌细胞株通过SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因后穿透组织基底膜的潜力。结果：能明显抑制人乳腺癌细胞的侵袭潜力。第四部分研究SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因对人乳腺癌细胞株诱导血管内皮细胞形成血管能力的影响。方法：应用人乳腺癌细胞株与人脐静脉内皮细胞(ECV-304)双室联合培养技术，观察表达不同水平透明质酸酶的人乳腺癌细胞株通过SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因后诱导ECV-304细胞形成血管能力的影响。研究表明这样能明显抑制人乳腺癌细胞诱导血管形成能力。

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符号说明

摘要

前言

第一部分SiRNA-HYAL1对人乳腺癌细胞透明质酸酶HYAL1基因表达的影响

一、材料

二、方法

三、结果

四、讨论

参考文献

第二部分SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因对人乳腺癌细胞增殖及细胞周期的影响

一、材料

二、方法

三、结果

四、讨论

参考文献

第三部分SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶基因HYAL1对人乳腺癌细胞侵袭力的影响

一、材料

二、方法

三、结果判定

四、统计学处理

五、结果

六、讨论

参考文献

第四部分SiRNA-HYAL1作用于透明质酸酶HYAL1基因对肿瘤血管生成潜力的影响

一、材料

二、方法

三结果判定

四、统计学处理

五、结果

六、讨论

参考文献

全文总结

综述RNA干扰技术的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间所完成的论文