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超声微泡造影剂携抗癌药物紫杉醇对子宫内膜癌RL-95-2细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制

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摘要

前言

第一部分超声微泡造影剂携抗癌药物紫杉醇对人子宫内膜癌细胞RL-95-2增殖及凋亡的影响

1材料和方法

2结果

3讨论

第二部分超声照射紫杉醇微泡抑制子宫内膜癌细胞RL-95-2增殖及诱导细胞凋亡的分子机制

1实验材料

2实验方法

3结果

4讨论

全文总结

附图

参考文献

文献综述:子宫内膜癌治疗进展

致谢

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摘要

目的: 探讨超声破坏紫杉醇微泡对子宫内膜癌RL-95-2细胞的生长抑制、凋亡诱导作用及其机制。 方法: 将体外培养的子宫内膜癌RL-95-2细胞分为4组,即空白对照组,紫杉醇组,紫杉醇微泡组,以及紫杉醇微泡联合超声辐照组。在光镜下观察细胞生长状况及形态;克隆生长实验及四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的生长抑制情况;用透射电镜以及流式细胞术(FCM)分别观察细胞凋亡以及细胞周期的变化;用逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)以及免疫印迹(Western blowing)方法分别检测增殖细胞核抗原(PCNA)以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-3(Caspase-3)在mRNA及蛋白水平表达的变化; 结果: 光镜下观察到RL-95-2细胞经紫杉醇微泡和超声辐照后活细胞数量减少,生长状况差,形态不规则。 克隆生长实验以及MTT法显示超声破坏紫杉醇微泡对子宫内膜癌RL-95-2细胞生长有显著的抑制作用;透射电镜分析显示超声破坏紫杉醇微泡诱导子宫内膜癌RL-95-2细胞凋亡;FCM检测显示细胞增殖受到抑制,细胞被阻滞于G<,0>/G<,1>期,进入S期和G<,2>/M期细胞减少RT-PCR及Western blotting分析显示超声破坏紫杉醇微泡下调PCNA mRNA以及蛋白的表达,同时上调细胞凋亡的关键执行者Caspase-3的表达。 结论: 超声破坏紫杉醇微泡所产生的空化效应对子宫内膜癌RL-95-2细胞生长有明显抑制作用,并且能诱导其凋亡,下调PCNA并同时上调Caspase-3可能是其作用机制之一。

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