熊果酸诱导鼻咽癌细胞株CNE-2Z凋亡的实验研究

摘要

目的：探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制。 方法：用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞，采用：①四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应；②流式细胞术(FCM)分析细胞周期和凋亡率；③应用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因bcl-2,bax和cox-2表达的变化；④Western blot检测CNE-2Z细胞内caspase 3的表达。 结果：1、MTT：熊果酸处理24h，48h和72h时的IC50分别为30.56μmol/L，31.94μmol/L和33.06μmol/L。熊果酸呈浓度依赖性的抑制CNE-2Z细胞增殖，差异有显著性(P＜0.05)。40-50μmol/L熊果酸分别作用24h、48h、72h后，CNE-2Z细胞几乎停止增殖。2、FCM：经熊果酸作用24h后，随着药物浓度的增加，细胞凋亡率逐渐升高，S期细胞的比例逐渐下降，G0/G1期细胞的比例逐渐增加，主要呈现G0/G1期阻滞，并存在浓度依赖性。3、免疫组化SP法：bcl-2,bax和cox-2的表达可见于胞膜和胞浆，在24h时随着药物浓度的升高，bax的表达逐渐增强；bcl-2和cox-2与对照组比较表达则明显降低。4、Western blot：用10～50μmol/L UA处理细胞24 h后，随着UA浓度增加，活化的caspase3蛋白条带逐渐加深。用Quantity One分析软件测定条带灰度值，求出每组caspase 3与β-actin条带的灰度比值，实验组与对照组的灰度比值差异有统计学意义(t=2.76，t0.05=2.1 32,p＜0.05)。 结论：熊果酸在体外对CNE-2Z细胞有诱导凋亡的作用，其作用机制可能是通过促进caspase 3的活化和bax的表达上调、bcl-2、cox-2的表达下调来实现。

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摘要

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

全文小结

参考文献

附 图

文献综述 熊果酸抗肿瘤机制研究进展

致 谢

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