转染maspin基因对胃癌细胞uPA和uPAR的影响

摘要

目的：研究转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响。探讨maspin基因抑制胃癌浸润转移的机制。 方法：克隆maspin基因全长，质粒PCR2.1用HindⅢ/XbaⅠ双酶切后靠T4连接酶与maspin基因连接，将该重建的maspin/PCR2.1表达载体转染进胃癌细胞株MKN28和SGC7901中，并用RT-PCR和western bolt检测maspin基因，uPA和uPAR表达的变化。 结果：1、成功构建maspin/PCR2.1重组质粒。转染质粒DNA被整合到SGC7901和MKN28细胞中，稳定筛选建株成功。 2、maspin、uPA和uPAR在mRNA水平的表达，MKN28细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后maspin的光密度值分别是0.3996±0.0807和1.4623±0.2168，差异有显著性(P＜0.05)，SGC7901细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后maspin的光密度值分别是0.3007±0.0716和1.4566±0.3219，差异有显著性(P＜0.05)。SGC7901细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后uPA的光密度值分别是0.6864±0.1658和0.3754±0.1847，差异有显著性(P＜0.05)，MKN28细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后uPA的光密度值分别是0.6133±0.1542和0.3609±0.1713，差异有显著性(P＜0.05)。SGC7901细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后uPAR的光密度值分别是0.6252±0.1064和0.3172±0.1736，差异有显著性(P＜0.05)，MKN28细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后uPAR的光密度值分别是0.5797±0.1172和0.2982±0.1409，差异有显著性(P＜0.05)。转染后maspin mRNA的表达均上调，uPA和uPAR mRNA的表达均下调。 3、maspin、uPA和uPAR在蛋白水平的表达，SGC7901细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后maspin的光密度值分别是0.2117±0.0135和0.8726±0.1648，差异有显著性(P＜0.05)。MkN28细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后maspin的光密度值分别是0.2901±0.0911和0.8812±0.1572，差异有显著性(P＜0.05)。SGC7901细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后uPA的光密度值分别是0.6861±0.2310和0.2677±0.0826，差异有显著性(P＜0.05)，uPAR的光密度值分别是0.6247±0.1407和0.2048±0.0714，差异有显著性(P＜0.05)。MKN28细胞稳定转染空质粒和maspin/PCR2.1表达质粒后uPA的光密度值分别是0.6197±0.1425和0.2641±0.0823，差异有显著性(P＜0.05)，uPAR的光密度值分别是0.5674±0.1256和0.2013±0.0703，差异有显著性(P＜0.05)转染后maspin蛋白的表达均上调，uPA和uPAR蛋白的表达均下调。 结论：转染maspin cDNA能降低胃癌细胞株MKN28和SGC7901中uPA和uPAR的表达，有效抑制其侵袭及转移潜能。

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摘要

前言

1材料和方法

2实验结果

3讨论

全文总结

参考文献

文献综述　Maspin与肿瘤抑制

致谢

硕士期间发表的论文和参研项目