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载紫杉醇超声微泡造影剂对人肝癌HepG细胞株生物学效应的实验研究

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摘要

前言

1.材料及方法

2.结果

3.讨论

全文总结

参考文献

附图

文献综述 作为药物和基因载体的超声微泡造影剂在肿瘤治疗中应用的研究进展

致谢

攻读学位期间发表论文、参研项目等情况

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摘要

目的:探索人肝癌HepG2细胞株培养参数及紫杉醇体外治疗适宜浓度,探讨超声辐照载紫杉醇微泡造影剂对HepG2细胞增殖的抑制,细胞周期的影响和形态学变化及诱导凋亡作用。 方法:体外培养HepG2细胞,采用形态学观察HepG2细胞生长情况;MTT法检测其生长特性;MTT法检测不同浓度紫杉醇对HepG2细胞的增殖抑制率,并以此确定适宜紫杉醇浓度。实验分4组:空白对照组、紫杉醇组、超声空白微泡组、超声载紫杉醇微泡组;MTT法观察不同时间点各处理组对HepG2细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期分布;透射电镜观察细胞形态学变化;Annexin V-FITC荧光染色检测细胞凋亡。 结果:在HepG2细胞培养过程中,以1×105/ml细胞数接种,于接种后约24-26小时达到对数生长期。单纯应用一定浓度紫杉醇能抑制HepG2细胞生长,有明显的浓度-效应-时间关系。与其他组比较,超声载紫杉醇微泡组对HepG2细胞的增殖抑制作用最强,将HepG2细胞阻滞在G2/M期;可见细胞凋亡,或凋亡小体形成。 结论:以1×105/ml细胞数接种细胞,于接种后约24小时可以进行后续实验;紫杉醇对HepG2细胞增殖有抑制作用;根据公式计算及参考文献后续实验紫杉醇剂量为1×10-7mol/L。超声辐照载紫杉醇微泡造影剂对HepG2细胞生长有明显抑制作用,将细胞明显阻滞在G2/M期并诱导其凋亡。

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