洛伐他汀和罗格列酮对单核/巨噬源性泡沫细胞ABCA1蛋白的干预

摘要

目的：以冠心病ACS患者外周血单核细胞为研究对象，探讨药物洛伐他汀、罗格列酮对其ABCAl蛋白表达的影响。 方法：1、一次性密度梯度超速离心法分离人血清脂蛋白，获取LDL；用Cu2+(15umol/L)氧化法获得氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)并鉴定；2、培养THP-1细胞；3、160nmol/L的佛波脂(PAM)诱导THP-1细胞成巨噬细胞，巨噬细胞与ox-LDL孵育成泡沫细胞，建立泡沫细胞模型；4、流式细胞技术检测载脂蛋白A-I、洛伐他汀、罗格列酮对THP-1源性泡沫细胞ABCAl蛋白表达的影响；5、洛伐他汀、罗格列酮干预对ABCAl介导的THP-1细胞源性泡沫细胞胆固醇逆向转运过程中TNF α、IL-6分泌的干预(ELJSA法)；6、密度梯度法分离冠心病ACS患者外周血单个核细胞，获得单核细胞(PBMC)；7、流式细胞技术检测洛伐他汀和罗格列酮对冠心病ACS患者外周血单核细胞ABCA1蛋白表达的干预。 结果：1、洛伐他汀与罗格列酮可使THP-1源性泡沫细胞.ABCA1蛋白表达增加。2、ApoA-I组THP-1细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量随ApoA-I浓度和孵育时间呈浓度和时间依赖性降低。3、APOA-I组与ABCA1单克隆抗体预处理+APOA-I组比较，泡沫细胞内胆固醇含量降低，差异有显著性，而ABCA1单克隆抗体预处理+APOA-I组较对照组比较，细胞内胆固醇含量未减少。4、洛伐他汀组(或罗格列酮组)与对照组和ABCA1单克隆抗体预处理+APOA-I组泡沫细胞内胆固醇含量无明显差异，而洛伐他汀(或罗格列酮)+APOA-I组较洛伐他汀组(或罗格列酮组)显著降低，洛伐他汀(或罗格列酮)+APOA-I组较ABCA1单克隆抗体预处理+洛伐他汀(或罗格列酮)+APOA-I组明显降低。5、ox-LDL组(泡沫细胞)TNF α、IL-6分泌较对照组(巨噬细胞)明显增加，ApoA-I+ox-LDL组、洛伐他汀(或罗格列酮)+ox-LDL组、洛伐他汀(或罗格列酮)+ApoA-I+ox-LDL组TNFα、IL-6分泌较ox-LDL组显著减少，而洛伐他汀(或罗格列酮)十ApoA-I+ox-LDL组较洛伐他汀(或罗格列酮)+ox-LDL组TNFα、IL-6的分泌进一步降低。 6、罗格列酮可使冠心病ACS患者外周血单核细胞ABCA1蛋白表达呈浓度和时间依赖性升高，而洛伐他汀对此未见明显影响。 结论：1、APOA-I蛋白使THP-1源性泡沫细胞内胆固醇含量呈浓度和时间依赖性降低，提示APOA-I是介导THP-1源性泡沫细胞RCT的重要蛋白。2、ApoA-I需协同ABCA1蛋白方能介导胆固醇逆向转运。3、泡沫细胞形成过程炎症反应活跃，RCT可抑制炎症反应，洛伐他汀和罗格列酮进一步抑制该炎症反应，推测可能与洛伐他汀和罗格列酮促进RCT有关。4、洛伐他汀可促进THP-1源性泡沫细胞ABCAl蛋白表达，但对ACS患者PBMC ABCA1蛋白表达无明显影响，提示洛伐他汀诱导ABCA1蛋白的表达具有细胞选择性，推测洛伐他汀只能促进THP-1源性泡沫细胞RCT。5、罗格列酮可促进THP-1源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达，且对ACS患者PBMC ABCA1蛋白的表达呈浓度和时间依赖性，提示罗格列酮可促进ACS患者RCT，这可能为罗格列酮抗AS机制之一。

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摘要

前言

第一部分洛伐他汀和罗格列酮对THP-1单核/巨噬源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达的影响

1材料与方法

2结果

3讨论

4参考文献

第二部分洛伐他汀和罗格列酮对ACS患者外周血单核细胞ABCA1蛋白表达的影响

1材料与方法

2结果

3讨论

4参考文献

全文总结

附插图

文献综述 ATP结合盒转运蛋白A1与动脉粥样硬化

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果