葡萄籽提取物原花青素诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其对凋亡相关基因的影响

摘要

目的:（1）观察葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制作用的特点及细胞形态学的变化情况。（2）检测不同浓度的葡萄籽提取物原花青素诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况。（3）探讨葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞中Survivin在分子和蛋白水平的表达情况。（4）分析葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其对其凋亡相关基因的影响，对葡萄籽提取物原花青素诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡的机制做初步的探讨。 方法:（1）在第一部分细胞培养实验中，采用细胞形态学观察、HE染色、MTT法观察葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞细胞形态学的变化及增殖抑制作用情况影响。（2）第二部分实验中，选取原花青素浓度在25μg/ml，分别与卵巢癌SKOV3细胞作用24h、48h、72h后，PI细胞周期、Annexin V-FITC双染和TUNEL及Caspase-3活性的检测等方法观察原花青素作用后，对卵巢癌SKOV3细胞凋亡情况的影响。（3）第三部分实验中，选取原花青素浓度在25μg/ml，分别与卵巢癌SKOV3细胞作用24h、48h、72h后，免疫组织化学DAB染色法测定SKOV3细胞中Survivin的表达情况。应用RT-PCR和Western-blot的方法检测卵巢癌SKOV3细胞内Survivin分子水平和蛋白水平的表达变化情况。 结果:（1）SKOV3细胞形态学和HE染色发现，原花青素作用后，细胞膜皱缩，体积缩小。MTT法检测后得出，原花青素作用时间越长，药物浓度越高，抑制细胞增殖现象越明显。（2）流式细胞仪、TUNEL及Caspase-3活性的检测显示，原花青素的诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用，同样呈时间和剂量依赖性，同时发现葡萄籽原花青素可以激活细胞内Caspase-3的表达活性。（3）葡萄籽原花青素可以明显降低细胞内Survivin在分子和蛋白水平的表达。 结论:（1）葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞具有明显的增殖抑制作用。（2）葡萄籽提取物原花青素可以诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡，激活细胞内Caspase-3的表达。（3）葡萄籽提取物原花青素诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡中，可能与下调细胞内Survivin的表达有一定的关系。（4）SKOV3细胞凋亡相关基因中，Survivin与Caspase-3的表达呈负相关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英汉缩略语名词对照

声明

前言

第一部分：葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖抑制作用的研究

1材料与方法

2实验结果

3讨 论

参考文献

第二部分：葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞诱导凋亡作用的研究

1材料与方法

2实验结果

3讨 论

参考文献

第三部分 葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞内Survivin表达影响的研究

1材料与方法

2实验结果

3讨 论

参考文献

全文小结

文献综述 原花青素防癌抗癌作用研究进展

实验图片

致 谢

攻读硕士学位期间发表论文