外伤性急性肺损伤患者NF-κB的活性以及NO、iNOS的含量变化

摘要

急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)是现代危重病医学中的一项难题,若不能得到较为及时有效的诊治,常会发展成为急性呼吸窘迫综合症(Acute respiratory distress syndrome,ARDS),从而严重威胁患者生命,且常需耗费大量医疗资源。ALI通常继发于脓毒症、严重感染、多发伤、战伤、误吸、大量输血以及缺血再灌注损伤等临床常见的急危重病症,临床中属于常见病、多发病。
　　 急性肺损伤由多种致病因素引起,以多形核中性粒细胞(Polymorphonuclear neutrophil,PMN)为主的炎性细胞在肺微血管内大量的积聚、浸润,过度表达并释放大量炎症介质,如TNF-α、IL-6、IL-8、ICAM-1、氧自由基等,使肺泡膜受到损伤,通透性增加,进而引起ALI的发生。
　　 核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)在调控参与ALI炎症介质众多基因的表达上起着关键作用,NF-κB活化与ALI的发生关系密切,这在国内外的许多基础和临床研究中均得到了验证。如何有效抑制NF-κB活化,避免炎症反应的“级联放大”,从而防止ALI甚至ARDS的发生,是一个尚未解决的难题。尽管目前临床上有多种多样的治疗手段,动物实验也进行了各种新的治疗方法的研究,但尚未有突破性进展。理想的有效治疗似乎应当围绕NF-κB活化的抑制以及防止PMN积聚、浸润和损伤肺血管内皮细胞进行,这两个关键点,已经成为目前探讨急性肺损伤发病机理和寻求治疗手段的新方向。
　　 一氧化氮(NO)是目前研究较多的一个具有自由基性质的生物信息分子和效应分子；一氧化氮合酶(NOS)则是生成NO的关键,也是唯一的限速酶。NF-κB作为一种具有多向性调节作用的快反应转录因子,能与多种基因启动子部位的κB位点特异性结合进而促进其转录。近年来的研究发现NF-κB可通过改变NOS的表达状况来调节NO生成,并在急性肺损伤中起重要作用。
　　 NF-κB激活后致使多种炎性细胞因子过度释放是引起炎症反应失控的关键；而中性粒细胞在细胞因子和趋化因子的作用下于肺部大量积聚、黏附、浸润,并释放大量氧自由基、蛋白酶等炎症介质致伤则是最终造成肺泡毛细血管基膜损伤、通透性增加的关键。
　　 目的:本研究旨在通过观察急性肺损伤患者血液NO、NOS以及中性粒细胞胞核中NF-κB含量的变化,探寻急性肺损伤时体内炎症反应的病理机制,为临床治疗提供理论依据。
　　 方法:收集2007年8月至2008年11月入住ICU的ALI患者50例为急性肺损伤组,以2008年1月至2008年10月健康体检人员50例为对照组,两组性别、年龄比较差异均无统计学意义,具有可比性。分别抽取两组肘静脉血5ml,采用硝酸还原酶法测定NO含量；采用化学比色法测定NOS水平；中性粒细胞胞核中NF-κB活性测定采用Western Blot方法进行检测。
　　 结果:急性肺损伤时,血清中NO含量显著上升,与对照组比较,差异有显著性,P<0.01；血清中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)含量显著上升,与对照组比较,差异有显著性,P<0.01；而固有型一氧化氮合酶(cNOS)含量变化不明显,与对照组比较,差异无显著性。
　　 Western Blot结果显示:急性肺损伤组胞核中NF-κB P65蛋白的表达与对照组比较,有显著升高,P<0.01.
　　 相关性分析:急性肺损伤时,中性粒细胞胞核中,NF-κB p65表达水平与血清中iNOS及NO的含量呈显著正相关,r值分别为0.569,0.510,P均<0.05；而与血清中cNOS含量无明显相关性。血清中NO含量与iNOS表达水平呈显著正相关关系,r值为0.743,(P<0.01)；而与cNOS含量无显著相关关系(P>0.05)。
　　 结论:急性肺损伤发生时,血清中NO、NOS含量升高,中性粒细胞胞核中,NF-κB p65表达水平上调。