辛伐他汀对人肺上皮A549细胞阿米洛利敏感钠通道a亚基表达的影响

摘要

目的：通过体外给药的方式观察辛伐他汀对人类肺上皮细胞(A549细胞代替)膜上皮钠通道α亚基(α-subunit of epithelial sodiumchannel,α-ENaC)表达的影响。
　　 方法：⑴常规传代培养A549细胞,按药物浓度不同和药物作用时间不同分为不同浓度给药组(A组)和不同药物作用时间组(B组),A组再按给药浓度不同分为A1组(空白组)、A2组(2.5uM组)、A3组(5uM组)、A4组(10uM组),培养24小时后进行相关检测。B组根据药物作用时间不同分为B1(空白组)、B2(10uM12h)、B3(10uM24h)、B4(10uM48h)组进行相关实验检测。⑵利用将凝胶电泳高分辨率和固相免疫检测的特异敏感结合起来的Western Blot免疫印迹技术,检测各组细胞膜上α-ENaC蛋白表达水平；用RNA反转录和cDNA的聚合酶链式扩增相结合的RT-PCR技术从基因水平检测各组细胞mRNA的表达水平。
　　 结果：①不同浓度辛伐他汀对A549细胞α-ENaC表达的影响:与A1组比较,A2组α-ENaC膜蛋白的表达水平无明显差别(P>0.05),A3组高于A1组(P<0.05),A4组表达水平明显高于A1组(P<0.01)；A2组α-ENaC mRNA表达水平与A1无明显差别(P>0.05),A3组表达增加(P<0.05),A4组显著增加(P<0.01)。②不同作用时间辛伐他汀对A549细胞α-ENaC表达的影响:B2组α-ENaC膜蛋白与B1组无明显差别(P>0.05),B3组高于B1组(P<0.05),B4组明显高于B1组(P<0.01)；B2组α-ENaC mRNA与B1组无明显差别(P>0.05),B3组、B4组表达增加(P<0.05),但B3组与B4组无明显差别(P>0.05)。
　　 结论：⑴辛伐他汀上调A549细胞上α-ENaC的表达,且呈剂量依赖性,大剂量辛伐他汀明显增强A549细胞膜上α-ENaC膜蛋白及mRNA的表达。⑵辛伐他汀对A549细胞α-ENaC表达的上调作用发生在给药24小时之后,而不是在12小时之内。