SB203580对乙醛刺激肝星状细胞凋亡及BCL-2蛋白表达影响研究

摘要

背景和目的:肝纤维化是由于细胞外基质在肝脏的过度沉积,是许多慢性肝病向肝硬化发展的中心环节。肝星状细胞(p)的激活是肝纤维化形成的核心环节,诱导活化的肝星状细胞凋亡可逆转肝纤维化的形成,是研究肝纤维治疗的重要方向之一。P38MAPK是MAPK家族的重要成员,参与多种细胞的活化、增殖及凋亡,目前P38MAPK信号通路在肝星状细胞中的作用机制研究报道较少。本实验通过P38MAPK特异性抑制剂SB203580作用乙醛刺激后的HSC-T6细胞株,观察SB203580对HSC-T6凋亡的影响;P-P38蛋白的变化和BCL-2蛋白表达的变化,初步探讨P38MAPK信号通路对HSC凋亡的影响及机制,为肝纤维化的临床治疗提供理论和实验依据。
　　 方法:不同浓度SB203580作用于乙醛刺激的HSC-T6;MTT法检测细胞抑制率:ELISA酶联法检测细胞核小体水平;FCM法检测细胞凋亡率:Western blot法检测P-P38蛋白变化;SABC法检测BCL-2蛋白表达水平。
　　 结果:MTT法提示SB203580抑制乙醛刺激的HSC-6生长,且呈剂量依赖性(p＜0.01)。
　　 2、ELISA酶联法显示随着SB203580浓度的增高,凋亡细胞核小体富集值逐渐增大(p＜0.01)。
　　 2、FCM法显示随SB203580浓度的增加,HSC-T6凋亡率逐渐升高(p＜0.01)。
　　 3、SB203580能抑制P38蛋白的磷酸化水平,且呈剂量依赖性(p＜0.01)。
　　 4、SB20380诱导乙醛刺激HSC-T6凋亡中伴随细胞内BCL-2蛋白阳性表达率的降低。呈剂量依赖性(p＜0.01)。
　　 结论:SB233580能诱导乙醛刺激的HSC-T6凋亡,其机制可能与提高P38MAPK的磷酸化水平和抑制BCL-2蛋白表达有关。