叶下珠复方Ⅱ号对肝星状细胞凋亡和miR-16/Bcl-2表达的影响

摘要

目的：观察叶下珠复方Ⅱ号体外对肝星状细胞(HSC-T6)凋亡和miR-16/Bc1-2表达的影响,进一步探讨其抗肝纤维化的作用机制.方法：体外培养HSC-T6细胞,分为空白对照组、叶下珠复方Ⅱ号高剂量组(3.60g/L)、中剂量组(1.80g/L)和低剂量组(0.9g/L),采用MTT法检测药物对HSC-T6细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,SYBR染料法实时荧光定量PCR检测药物处理后HSC-T6细胞miR-16和Bcl-2 mRNA表达的改变,Western Blot法测定Bc1-2蛋白的表达变化.结果：叶下珠复方Ⅱ号处理HSC-T6细胞后,高、中、低各剂量组对HSC-T6细胞增殖均有明显的抑制作用,随着叶下珠复方Ⅱ号浓度的增加,细胞的凋亡率也逐渐增加;叶下珠复方Ⅱ号各处理组miR-16的表达显著增加,呈现明显的剂量-效应关系,且Bc1-2mRNA和蛋白质表达明显减少,与对照组比较,差异均具有显著性意义(P＜0.01).结论：叶下珠复方Ⅱ号能显著抑制HSC-T6细胞增殖和诱导其凋亡,其作用机制与提高miR-16的表达,抑制其靶基因Bcl-2的表达有关.