高效液相色谱-质谱法在筛选胆管癌肿瘤标志物中的应用

摘要

目的:
　　 1应用蛋白质组学技术筛选人胆汁中与胆管癌相关的蛋白质分子。
　　 2探讨人胆管癌胆汁中OLFM4及CD146蛋白水平的表达。
　　 方法:
　　 1应用非离子型脱脂剂结合分子筛超滤方法制备纯化胆汁样本
　　 2通过高效液相色谱-质谱(HPLC-CHIP-MS/MS)鉴定差异表达的蛋白质。
　　 3用Spectrum Mill software对检测结果进行分析
　　 4采用Western Blotting技术分析胆汁中OLFM4及CD146蛋白水平的表达
　　 结果:
　　 1与正常人胆汁相比较,在胆管癌患者胆汁中,检测到109个蛋白质,其中12个为新增蛋白质,其功能主要涉及癌细胞的发生、增殖、分化、转移等。
　　 2人正常胆汁中OLFM4及CD146低表达,而在胆管癌胆汁中其表达上调。CD146的表达在胆总管下段胆管癌高于肝门部胆管癌。
　　 结论:
　　 1高效液相色谱-质谱鉴定的12个差异表达蛋白质可能成为研究胆管癌的生物学分子标志物。
　　 2人胆管癌胆汁中存在高表达OLFM4及CD146蛋白。