中药接骨I号超声透入对骨折愈合过程中BMP-7表达影响的实验研究

摘要

目的:建立新西兰大白兔双侧桡骨中段骨折的动物模型,观察中药超声透入疗法治疗桡骨骨折的疗效及中药超声透入对骨折愈合过程中骨形态发生蛋白-7表达的影响。
　　 方法:构建84只健康新西兰大白兔双侧桡骨中段3.0 mm骨缺损的骨折模型,建模成功后将实验动物随机分成3组(实验组、超声组、对照组,每组各28只);实验组以含接骨Ⅰ号(主要成分为:红花、桃红、桂枝、川芎、乳香、没药、元胡、锻自然铜、续断、狗脊等)的自制中药超声耦合剂行中药低强度脉冲超声透入治疗;超声组每日于骨折部位以普通超声耦合剂(不含接骨Ⅰ号)行低强度脉冲超声治疗;对照组予以无超声信号输出的超声探头行假刺激治疗。分别于术后3、6、9、12、15天取骨折局部组织行RT-PCR和免疫组织化学检测,分别从基因和蛋白水平了解各组骨折局部BMP-7的表达差异。术后4、6周经耳缘静脉麻醉后行X线检查以观察不同治疗方法对骨折愈合的疗效差异,然后处死实验动物以骨折部位为中心截取2.0 cm长桡骨标本制作石蜡组织切片,行HE染色,从组织学角度进一步了解骨折的愈合情况。
　　 结果: X线片检查显示实验组骨折愈合快于超声组及对照组,超声组骨折愈合快于对照组。HE切片所见骨折愈合情况与X线片观察结果一致。RT-PCR提示:术后3天,BMP-7灰度值/内参β-actin灰度值在实验组高于对照组(P＜0.05);术后6、9、12天BMP-7 mRNA表达逐渐增强,实验组均高于超声组及对照组(P＜0.05),其中在术后6、9、12天实验组BMP-7表达与对照组差异具有显著统计学意义(P＜0.01)、术后12天实验组与超声组表达差异具有显著统计学意义(P＜0.01);术后15天对照组呈现下降趋势。免疫组织化学结果提示:术后3天起各组BMP-7表达水平逐渐增强,实验组于术后15天呈现下降趋势;术后3天,实验组BMP-7表达强于对照组(P＜0.05);术后第6、9、12、15天实验组均强于超声组及对照组(P＜0.05),其中术后9、12天实验组与对照组表达差异具有显著统计学意义(P＜0.01)。
　　 结论:结果表明,中药低强度脉冲超声透入疗法能促进兔桡骨骨折的修复,缩短骨折修复所需时间,其促进骨折愈合的作用与其促进BMP-7表达有关。