多奈哌齐对PC12细胞淀粉样体蛋白α代谢途径的影响

摘要

目的：
　　观察多奈哌齐对PC12细胞淀粉样前体蛋白(APP)非淀粉样物质代谢途径(α途径)的影响以及可能的细胞信号机制。
　　方法：
　　以体外培养的PC12细胞为观察对象，分为空白对照组、多奈哌齐(20μmol/L)组、多奈哌齐(20μmol/L)+PI3-K抑制剂LY294002组(LY组)、多奈哌齐(20μmol/L)+P38抑制剂SB203580组(SB组)、多奈哌齐(20μmol/L)+JNK抑制剂SP600125组(SP组)。各抑制剂组在加入多奈哌齐前30分钟分别给予相应的抑制剂。培养24h后，用Western blot检测细胞培养上清液中的APP、ADAM10和ADAM17蛋白水平；ELISA方法检测细胞培养上清液中的sAPPα和sAPP/β水平。
　　结果：
　　1.APP蛋白表达：空白对照组、多奈哌齐组、LY组、SB组和SP组的APP蛋白表达水平，各组间比较无统计学意义(P>0.05)。
　　2.ADAM10和ADAM17蛋白：用Western blot检测ADAM10和ADAM17蛋白。与对照组相比较，多奈哌齐组、LY组、SB组和SP各组ADAM10和ADAM17均有增加，差异均有统计学意义(P<0.05)。各抑制剂组与多奈哌齐组比较，LY组ADAM10和ADAM17表达无明显差异(P>0.05)，SB及SP组ADAM10和ADAM17表达减少，差异有统计学意义(P<0.05)。
　　3.sAPPα和sAPPβ表达：用ELISA检测sAPPα及sAPPβ蛋白。与对照组比较，多奈哌齐组、LY组、SB组和SP各组sAPPα表达均有增加，sAPPβ表达均有减少，差异有统计学意义(P<0.01)。各抑制剂组与多奈哌齐组比较，LY组sAPPα和sAPPβ表达无明显差异(P>0.05)，SB及SP组sAPPα表达明显降低，sAPPβ表达明显增加，差异有统计学意义((P<0.01)。
　　结论：
　　多奈哌齐能使APP的代谢向非淀粉样途径(α代谢途径)转变，其机制可能涉及JNK或P38信号通路，而与PI3-K通路无关。