正常老年大鼠和转基因老年痴呆小鼠海马有髓神经纤维改变的研究

摘要

第一部分大鼠海马有髓神经纤维老年改变的体视学研究
　　目的：运用体视学方法分别对不同月龄雌、雄性大鼠海马有髓神经纤维进行定量研究，以期进一步认识大鼠海马及其内有髓神经纤维的老年改变规律，为老年大鼠行为学改变提供理论基础。
　　方法：Sprague-Dawley大鼠，青年组(6月龄)雌、雄性各5只，中老年组(18月龄)雌、雄性各5只，老年组(28月龄)雌、雄性各5只。用Morris水迷宫进行连续5天的空间学习、记忆能力的测试，记录动物潜伏期(寻台时间)，即从进入入水点开始到动物找到水迷宫中的平台并且四肢均爬上平台所用的时间。行为学测试后，随机抽取5-6块海马组织块制作成电镜标本，运用体视学方法计算大鼠大脑海马总体积、海马内有髓神经纤维总长度、总体积和有髓神经纤维平均直径。
　　结果：老年组雌、雄性大鼠的空间学习、记忆能力较同性别青年组和中老年组并没有显著性降低；青年组和中老年组雌性大鼠的空间学习、记忆能力显著性低于同月龄组雄性大鼠。老年组雌、雄性大鼠大脑海马内有髓神经纤维总体积和总长度较同性别青年组和中老年组没有出现显著性降低；青年组和中老年组雌性大鼠大脑海马内有髓神经纤维总长度显著性低于同月龄雄性大鼠(分别是33.7％和23.5％，P<0.05)。
　　结论：
　　1.青年组及中老年组大鼠的空间学习、记忆能力及海马内有髓神经纤维总长度存在显著性性别差异。
　　2.大鼠的空间学习、记忆能力与海马内有髓神经纤维的总长的存在相关性。
　　3.老年组大鼠的空间学习、记忆能力及海马内有髓神经纤维不存在显著性改变。
　　第二部分 Tg2576小鼠早期行为学和海马内有髓神经纤维的改变
　　目的：研究各月龄Tg2576转基因AD模型鼠行为学、脑内Aβ蛋白含量和海马及其亚区中有髓神经纤维的改变，以期探索早期AD行为学改变的形态学基础，为今后早期诊断、早期预防及早期治疗AD提供理论依据。
　　方法：4、6、8、10月龄雄性Tg2576转基因小鼠各15只；同窝出生月龄匹配的雄性野生型小鼠各15只。用Morris水迷宫进行连续6天的定位航行试验，记录动物潜伏期(寻台时间)；在第7天进行空间探索试验，记录测试动物在前6天水迷宫测试时平台所在象限的时间百分比以及穿过原平台区域的次数。Morris水迷宫行为学测试结束后，从每组动物中随机抽取6只小鼠，Elisa法检测每只小鼠海马内Aβ40、Aβ42蛋白的含量；从每组剩余的小鼠中随机抽取5只，在海马内随机抽取5～6块(CA1和DG区各2～3块)组织块制作成电镜标本，运用体视学方法计算小鼠海马总体积、海马内有髓神经纤维总长度、总体积以及海马内有髓神经纤维髓鞘的总体积。
　　结果：4、6和8月龄转基因小鼠与对照组小鼠的定位航行试验和空间探索试验中的各种参数及结果均无显著性差异；10月龄转基因AD小鼠定位航行试验中的潜伏期显著性长于对照组小鼠(p<0.05)，但10月龄两组动物空间探索试验中的各种参数及结果无显著性差异。各月龄转基因AD小鼠海马内Aβ40蛋白浓度显著高于对照组小鼠(p<0.05)，转基因小鼠海马内Aβ42蛋白浓度从6月龄开始才较对照组小鼠显著增高(p<0.05)，4月龄转基因小鼠与对照组小鼠海马结构内Aβ42蛋白浓度并无统计学差异(p>0.05)。10月龄转基小鼠与对照组小鼠海马内有髓神经纤维总长度无统计学差异；10月龄转基小鼠与对照组小鼠海马CA1区内有髓神经纤维总长度无统计学差异；10月龄转基因小鼠海马DG区内有髓神经纤维总长度较对照组小鼠有显著性降低(p<0.05)。
　　结论：
　　1.转基因AD小鼠出现行为学改变的时间大约为10月龄。
　　2.4～6月龄为转基因AD小鼠Aβ显著升高的时间。
　　3.与对照组小鼠比较，10月龄转基因AD小鼠DG区内有髓神经纤维总长度显著性降低，这一改变可能是10月龄转基因AD小鼠行为学改变的重要形态学基础。