高强度聚焦超声人神经母细胞瘤SD幼鼠模型骨骼生长发育的影响研究

摘要

第一部分、人神经母细胞瘤SD幼鼠模型建立的实验研究
　　目的:建立人神经母细胞瘤SD幼鼠模型，探讨其作为人神经母细胞瘤非免疫缺陷动物模型用于实验研究的可行性。
　　方法:体外培养人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞，取对数生长期瘤细胞，开腹接种于幼年SD大鼠左侧肾上腺区肾筋膜内，接种(1-3)×107/ml的单细胞悬液0.2ml。定期B超监测肿瘤大小，绘制肿瘤生长曲线，并免疫组化检测神经母细胞瘤特异性标志物NSE的表达。
　　结果:35只SD大鼠中，荷瘤成功35只，总荷瘤率为100％。其中全身转移有明显恶病质的SD大鼠3只，其余32只为接种局部肿瘤生长。肿瘤生长曲线提示在种瘤后9天左右为肿瘤生长高峰期，种瘤17天左右肿瘤开始缩小。该实验肿瘤生长监测组有2只荷瘤鼠在B超监测1月左右发生消退，其余荷瘤鼠均在种瘤3个月后消退。所取肿瘤组织免疫组化NSE表达均为阳性。
　　结论:成功建立人神经母细胞瘤SD幼鼠模型，该模型荷瘤率高，为研究瘤细胞在非免疫缺陷的正常免疫机体内生长的生物学特性打下良好的基础，为局部瘤体的物理治疗（如HIFU治疗等）提供经济实用的短期实验动物模型。
　　第二部分、高强度聚焦超声对人神经母细胞瘤SD幼鼠模型骨骼生长发育的影响
　　目的:通过比较正常SD大鼠和不同能量梯度的高强度聚焦超声(High intensity focus ultrasound，HIFU)治疗后的人神经母细胞瘤SD幼鼠模型，探讨HIFU消融对人神经母细胞瘤SD幼鼠模型骨骼生长发育的影响。
　　方法:选用4周龄SD大鼠90只，分为2组，每组45只。A组为正常对照组，B组为HIFU组:选择人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞接种于SD大鼠左侧肾上腺区肾筋膜内，B超监测肿瘤最大直径约1.0-1.5cm时在腹腔麻醉下给予不同能量梯度的HIFU治疗。A、B两组分别于HIFU治疗后3天、2周和4周监测SD大鼠的身长，肉眼及X线检查骨骼有无畸形出现，收集HIFU辐射区周围的脊柱和肋骨进行组织病理学比较，酶联免疫法(EnzymeLinked Immunosorbent Assay，ELISA)检测血清骨碱性磷酸酶(Bone-specific alkaline phosphatase，BALP)水平进行比较。
　　结果:肉眼观察HIFU治疗后不同时期人神经母细胞瘤SD幼鼠模型均未发现有明显畸形出现。X线检查发现仅有1只人神经母细胞瘤SD幼鼠模型在HIFU治疗后4周出现脊柱裂，余未见任何异常。SD大鼠身长增长值及血清BALP在HIFU后3天、HIFU后2周存在显著差异(P＜0.05);而在HIFU后4周差异无统计学意义(P＞0.05)。组织病理学观察:B组在HIFU后3天、HIFU后2周骨小梁分布较A组稀疏;但在HIFU后4周时A、B组骨小梁均疏密一致，分布均匀。
　　结论:高强度聚焦超声治疗人神经母细胞瘤SD幼鼠模型后，短时间内可抑制人神经母细胞瘤SD幼鼠模型的骨骼生长发育，但HIFU对其的抑制作用会随青春期骨骼生长发育高峰期的作用在成年期消失。

目录

声明

符号说明

摘要

前言

参考文献

第一部分：人神经母细胞瘤SD幼鼠模型建立的实验研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第二部分：HIFU治疗对人神经母细胞瘤SD幼鼠模型骨骼生长发育的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

结论

文献综述 神经母细胞瘤的治疗进展

致谢

攻读硕士期间发表的论文