小鼠子宫蜕膜细胞表达CD82/KAII抑制外胎盘锥的侵袭

摘要

CD82/KAI1是一种广泛存在肿瘤抑制因子，它能抑制肿瘤细胞的能动性和侵袭性。肿瘤是危害人类健康最严重的疾病之一，在肿瘤细胞的生物学特性中，侵袭性和转移性尤为关键，这也是恶性肿瘤的重要标志。比较发现，在哺乳动物胚胎着床时，滋养层细胞的侵袭能力和行为方式与肿瘤细胞十分相似。在小鼠妊娠过程中，胚胎滋养层细胞侵入母体子宫内膜与蜕膜共同构成胎盘，以保证妊娠的正常进行。滋养层细胞的过度侵入或侵入不足都会对母体和胚胎的发育造成伤害。根据本课题组前期实验结果表明：CD82/KAI1在小鼠的子宫内膜上均有表达，因此推测，CD82/KAI1对蜕膜细胞促使滋养层侵袭有影响。
　　目的：研究CD82/KAI1在小鼠子宫蜕膜细胞及外胎盘锥的表达及其对外胎盘锥侵袭的影响。
　　方法：
　　1.将设计好的CD82/KAI1干扰序列插入pSES-HUS载体中，酶切鉴定和测序检测，构建pAdeasy-SES-HUS-CD82/KAI1siRNA和pAdeasy-SES-HUS载体；
　　2.体外分离培养小鼠子宫基质细胞并诱导蜕膜化，采用RT-PCR、western blot技术检测CD82/KAI1在蜕膜细胞中的表达；
　　3.取d8小鼠子宫，冰冻切片，免疫荧光技术检测CD82/KAI1在外胎盘锥和蜕膜中的表达；
　　4.小鼠外胎盘锥与蜕膜细胞共培养，观察外胎盘锥的生长情况。
　　结果：
　　1.成功构建了重组CD82/KAI干扰腺病毒，腺病毒滴度为7.2×1011pfu/ml；
　　2.CD82/KAI1mRNA和蛋白在小鼠蜕膜细胞有明显的表达；
　　3.免疫荧光检测发现在小鼠外胎盘锥中也有CD82/KAI1蛋白的表达；
　　4.CD82/KAI1能抑制小鼠外胎盘锥对子宫内膜的侵袭。
　　结论：
　　1.在小鼠子宫蜕膜细胞和外胎盘锥中都有CD82/KAI1的表达；
　　2.小鼠子宫蜕膜细胞表达CD82/KAI1抑制外胎盘锥的侵袭。