1H NMR对单纯疱疹病毒1型感染神经胶质细胞的代谢组学研究

摘要

背景:单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type1，HSV-1）是有包膜的双链DNA病毒，感染率高，作用范围广，在中枢神经系统主要导致单纯疱疹病毒性脑炎（herpes simplex encephalitis，HSE）。HSE因发病率较高成为威胁人类健康的重要疾病而受到高度重视。此外，据研究发现HSV-1与老年痴呆症、难治性局灶性癫痫、多发性硬化和急性播散性脑脊髓炎也有密切的关系。但HSV-1感染的分子机制仍不清楚，据以往的研究表明HSV-1感染扰乱了细胞的代谢，但缺乏代谢物整体改变的研究。
　　目的:研究单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus type1，HSV-1）对人类少突胶质细胞（oligodendroglia cells，OL细胞）代谢的影响，从而探讨HSV-1感染的机制。
　　方法:将OL细胞随机分为两组:一组感染HSV-1，另一组不感染HSV-1。当感染细胞出现明显的细胞病变效应时，用甲醇:氯仿法分别提取两组培养液中的代谢产物，代谢物经核磁共振氢谱(1H nuclearmagnetic resonance，1H NMR)检测和鉴别，最后由偏最小二乘法-判别分析(Partial Least Square Discriminant Analysis，PLS-DA)对数据进行分析。
　　结果:感染HSV-1和未感染HSV-1的OL细胞代谢物存在明显差异，主要差异代谢物包括氨基酸（亮氨酸、谷氨酸、缬氨酸、丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、谷氨酰胺）、乳酸、肌酸、葡萄糖。
　　结论:HSV-1显著地扰乱了少突胶质细胞的代谢平衡，可能影响了三羧酸循环、能量代谢和嘌呤核苷酸合成，从而建立它自己特有的代谢网络。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 细胞和病毒培养

1．3 HSV-1感染OL细胞

1．4 细胞培养液代谢物的提取

1．5 样品的准备和NMR分析

1．6 NMR图谱的数字化处理

1．7 统计学分析

2 结果

2．1 空斑实验

2．2 HSV-1感染OL细胞

2．3 细胞培养液代谢物的1H NMR谱

2．4 感染组与对照组细胞培养液代谢物分析

3 讨论

3．1 氨基酸及其衍生物

3．2 有机酸及葡萄糖

全文总结

参考文献

文献综述 代谢组学研究进展

致谢

攻读硕士学位期间的研究成果及发表的学术论文