脂联素及其受体在正常人和1型糖尿病小鼠视网膜中的表达

摘要

目的:研究显示脂联素(APN)与某些视网膜疾病密切相关，本课题旨在探讨APN及APN受体(AdipoRs)是否在正常人及小鼠视网膜中有表达，以及在1型糖尿病(T1DM)小鼠视网膜中其表达水平是否发生改变。
　　 方法:人眼标本获自重庆市眼库，eNOS基因敲除小鼠（eNOS-/-）随机分为T1DM组和对照组，T1DM小鼠模型经腹腔注射链脲佐菌素（60ml/kg，STZ）诱导获得。通过免疫荧光检测并定位AdipoRs在视网膜中的表达。从视网膜、RPE-脉络膜组织中提取总蛋白和总RNA，用ELISA方法检测APN蛋白水平，用实时定量PCR(qRT-PCR)测量APN受体mRNA水平，用Western blotting检测蛋白水平。用非对称t检验进行统计学分析，p＜0.05认为具有统计学意义。
　　 结果:APN、AdipoR1和AdipoR2在正常人及小鼠视网膜中均有表达，AdipoR1定位于人、小鼠视网膜的内界膜和光感受器外段，而AdipoR2在人、小鼠冰冻切片未见定位。与对照组小鼠相比，APN和AdipoR1在T1DM小鼠视网膜中表达增加，而AdipoR2表达水平无明显改变。
　　 结论: APN，AdipoR1和AdipoR2在人、小鼠视网膜中有表达提示APN系统可能在视网膜中起一定作用，而在T1DM小鼠视网膜中APN，AdipoR1蛋白表达量上升提示APN-AdipoR1轴在糖尿病视网膜中被激活。

目录

声明

符号说明

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 实验用仪器设备

1．2 主要试剂

1．3 研究对象

1．4 T1DM小鼠模型的建立

1．5 免疫荧光

1．6 EIISA检测

1．7 实时荧光定量PCR

1．8 Western bloting

1．9 统计学分析

2 研究结果

2．1 T1DM组和对照组小鼠血糖

2．2 APN及AdipoRs在人眼中的表达

2．3 APN及AdipoRs在小鼠眼中的表达

2．4 免疫荧光定位人、小鼠眼中AdipoRs的表达

2．5 APN和AdipoRs在T1DM小鼠视网膜中的表达

3 讨论

3．1 APN及其受体在视网膜中的表达

3．2 APN及其受体在T1DM小鼠视网膜中的表达

4 本研究结论及创新点

4．1 本研究结论

4．2 本研究的创新点

全文小结

参考文献

文献综述 脂联素及其与视网膜疾病相关性的研究进展

致谢

硕士期间发表的论文