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水通道蛋白9在人肝癌组织与癌旁正常肝组织中的表达差异

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摘要

前言

1 材料和方法

1.1 材料

1.2 实验步骤和方法

2 结果

2.1 组织病理学结果

2.2 免疫组织化学结果

2.3 免疫蛋白印迹分析实验结果

2.4 逆转录聚合酶链法实验结果

3 讨论

全文结论

参考文献

文献综述

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术文章

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摘要

目的:
  探讨AQP9在人肝细胞癌组织与癌旁正常肝组织中的表达差异及意义。
  方法:
  1.收集2012年10月1日到2013年2月30日重庆医科大学附属第一医院及第二医院肝胆外科原发性肝细胞癌新鲜手术组织标本共20组,分别应用免疫组织化学(IHC)技术、逆转录聚合酶链(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)法在基因及蛋白水平、定性及定位层面上检测肝细胞癌组及配对癌旁正常肝组织中AQP9的表达情况。
  2.用统计学方法进行分析,以确定AQP9在肝癌组与癌旁正常肝组织组之间的表达是否具有差异,且差异是否具有统计学意义。
  结果:
  1.应用免疫组织化学技术、逆转录聚合酶链法、蛋白免疫印迹方法,均可检测出AQP9在两组织中的表达。
  2.免疫组化实验结果显示,在癌旁正常肝组织上:高倍视野(×200)下阳性着色细胞数约70%得3分,阳性着色强度棕褐色得3分,两者计分相乘即为阳性等级9分为强阳性(+++)。在癌组织上:高倍视野(×200)下阳性着色细胞数约30%得2分,阳性着色强度色浅得2分,两者计分相乘4分弱阳性(+),两组间的差异具有统计学意义(P<0.01)。
  3.蛋白免疫印迹实验结果显示,癌旁正常肝组织中AQP9与内参灰度值之比为2.53±0.81,肝癌组织中AQP9与内参灰度值之比为0.33±0.2,两组间的差异具有统计学意义(P<0.01)。
  4.逆转录聚合酶链法实验结果显示,癌旁正常肝组织中AQP9的△Ct值为2.64±0.70,肝癌组织中AQP9的△Ct值为6.64±1.76,两组间差异具有统计学意义(P<0.01)。
  结论:
  1.在癌旁正常肝组织和肝癌组织中均能检测到AQP9的表达;
  2.在免疫组织化学、逆转录聚合酶链法、蛋白免疫印迹法实验中,AQP9在肝癌组织的表达均低于在癌旁正常肝组织中的表达。

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