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STIM1在幼年和成年大鼠外伤性癫痫中的表达研究

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摘要

前言

1 材料与方法

1.1 试剂

1.2 动物及分组

1.3 外伤性癫痫模型制作

1.4 外伤性癫痫模型的行为学观察及成功的判定

1.5 标本采集

1.6 Real—time PCR

1.7 Western blot法检测

1.8 免疫组织化学法检测

1.9 统计学处理

2 结果

2.1 行为学观察

2.2 RT-PCR检测成鼠与幼鼠皮层STIM1的mRNA表达

2.3 Western blot检测成鼠及幼鼠皮层STIM1蛋白表达

2.4 免疫组织化学检测成鼠与幼鼠皮层STIM1的表达

3 讨论

全文总结

参考文献

附图

文献综述 钙离子通道在外伤性癫痫发生机制中的研究进展

致谢

攻读硕士期间发表的论文

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摘要

目的:研究并探讨钙释放激活钙离子通道(calcium release-activatedcalcium,CRAC)关键蛋白基质相互作用分子1(stromal interactionmolecule1,STIM1)在幼年和成年大鼠外伤性癫痫中的表达差异及意义。
  方法:取SD雄性幼年、成年大鼠各94只,按照完全随机设计分为成年、幼年假手术组:皮层注射生理盐水,各42只;成年、幼年模型组:铁离子皮层注射外伤性癫痫模型,各52只。建模后观察大鼠癫痫行为学表现;分别于6、24、72h,7、14、21、28d7个时相点完全随机选取6只大鼠,处死取伤灶周边皮层脑组织,用实时荧光定量PCR、Westernblot和免疫组织化学法分别检测STIM1的mRNA与蛋白的表达。
  结果:
  1.模型组成年、幼年大鼠均出现典型痫性发作,幼鼠模型组建模成功率为91.3%,成鼠模型组建模成功率为84%(定义Racine评分3分及以上为建模成功)。
  2.幼鼠模型组比成鼠模型组发作次数明显增多(P<0.05),每次发作持续时间显著延长(P<0.05),发作程度较重。
  3.建模后各组STIM1的mRNA和蛋白表达都有明显增高,72h为高峰(P<0.05),但幼鼠与成鼠相比较,STIM1的mRNA和蛋白在各时间点表达增高的趋势更加显著(P<0.05)。
  结论:幼鼠较成鼠更容易发生外伤性癫痫,STIM1在幼鼠中较成鼠的表达也更高,提示STIM1表达增加、CRAC激活可能是幼鼠更易发生外伤性癫痫的机制之一。

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