联合运用Survivin和VEGF反义寡核苷酸对裸鼠人肺腺癌A549移植瘤的生长抑制作用

摘要

目的：
　　探讨Survivin反义寡核苷酸联合VEGF反义寡核苷酸在裸鼠（BALB/c-NU全雌）体内对人肺腺癌细胞A549移植瘤的生长抑制作用。
　　方法：
　　取一定数量对数期生长正常、活性良好的A549细胞注入裸鼠皮下。待植瘤成功后，将裸鼠随机分为5组:空白对照组、脂质体对照组、VEGF处理组、Survivin处理组，Survivin-VEGF联合处理组，分别予以生理盐水、脂质体、VEGF ASDON-脂质体混合物、 SurvivinASODN-脂质体混合物局部注射，每隔1天注射一次，观察各组肿瘤的生长情况。注射两周后，处死裸鼠，并取下肿瘤。分别以Western blot、荧光定量PCR检测肿瘤组织Survivin及VEGF各自蛋白和RNA的表达情况，用免疫组化法检测Cyclin B1蛋白表达和进行微血管密度计数（CD34染色）。实验结果用(x)±s表示，数据用SPSS17.0软件处理。
　　结果：
　　VEGF反义寡核苷酸和Survivin反义寡核苷酸，无论联合或单独使用，均能有效地降低其靶基因的表达并抑制肿瘤的生长，且联合处理组强于单反义寡核苷酸处理组。 Survivin处理组肿瘤质量为(0.479±0.046)g，VEGF处理组肿瘤质量为(0.476±0.079)g，Survivin-VEGF联合处理组肿瘤质量为（0.265±0.010）g，各组与空白组差异有显著性P＜0.05，且联合处理组作用结果优于各单反义组(P＜0.05)。Survivin-VEGF联合处理组中Survivin和VEGF蛋白及RNA的表达较Survivin处理组和VEGF处理组更低，P值均＜0.05。此外，Survivin-VEGF联合处理组显著降低了肿瘤组织微血管密度计数(MVD)，也较各单反义寡核苷酸处理组具有更强的作用效果，Survivin处理组（13.27±2.19），VEGF处理组(11.40±1.18)，Survivin-VEGF联合处理组（10.27±1.75），各单反义组与联合组之间差异具有显著性(P＜0.05)。Survivin-VEGF联合处理组停滞于G2/M期的细胞也较Survivin处理组和VEGF处理组明显增多(P＜0.05)。
　　结论：
　　在裸鼠移植瘤A549的治疗中，联合使用VEGF反义寡核苷酸和Survivin寡核苷酸对肿瘤的生长抑制作用优于单用VEGF反义寡核苷酸或Survivin反义寡核苷酸。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

1．3 统计学处理

2 结果

2．1 肿瘤生长情况观察

2．2 肿瘤组织内VEGF和Survivin蛋白的表达

2．3 肿瘤组织内VEGF和Survivin mRNA的表达

2．4 肿瘤组织内微血管密度计数

2．5 肿瘤组织Cyclin B1蛋白的表达

3 讨论

全文总结

参考文献

文献综述 抗凋亡因子Survivin与非小细胞肺癌关系的研究进展

致谢

攻读硕士期间发表的论文