肝细胞肝癌中转录因子FOXM1表达的临床意义及其调控AFP表达与分泌的分子机制研究

摘要

目的:研究人肝细胞肝癌(HCC)中转录因子FOXM1表达的临床意义及其调控AFP表达与分泌的分子机制。
　　方法:
　　(1)采用Western blot技术检测52例HCC患者肝癌组织中FOXM1蛋白的表达，并分析其与HCC患者临床病理特征的关系;
　　(2)采用荧光定量PCR技术检测HCC患者肝癌组织中AFPmRNA表达水平，电化学发光法检测患者术前血清AFP分泌水平，通过Pearson相关性分析方法分析HCC患者癌组织中FOXM1蛋白表达水平和AFP mRNA表达水平及术前血清AFP分泌水平三者的相关性;
　　(3)最佳MOI的重组FOXM1腺病毒分别感染AFP高表达的HepG2、HepG2.2.15细胞和AFP低表达的SMMC7721细胞，感染24 h后通过荧光定量PCR技术验证细胞内FOXM1 mRNA表达情况，感染48 h后通过Western blot技术验证细胞内FOXM1蛋白表达情况及其下游基因cyclinB1蛋白表达变化情况;
　　(4)以最佳MOI的重组FOXM1腺病毒感染HepG2、HepG2.2.15和SMMC7721细胞，感染24 h后通过荧光定量PCR检测FOXM1蛋白对AFP mRNA表达的影响，感染48 h通过Western blot和电化学发光法观察FOXM1蛋白对AFP蛋白的表达及分泌的影响。
　　结果:
　　(1) FOXM1表达与HCC肿瘤大小和淋巴转移有关(P1=0.039，P2=0.039)，而与年龄、性别、肝硬化、HBV感染状态和肿瘤分期无关。
　　(2) HCC患者肝癌组织中FOXM1蛋白表达水平与AFP mRNA表达水平及术前血清AFP分泌水平均呈正相关（r=0.448，P=0.001;r=0.381，P=0.005）。
　　(3)HepG2和HepG2.2.15细胞中FOXM1可显著促进AFP mRNA和蛋白的表达及AFP的分泌;SMMC7721细胞中FOXM1仅可促进AFP mRNA的表达，但不能促进AFP蛋白的表达和分泌。
　　结论:
　　(1)人肝细胞肝癌中FOXM1表达与肿瘤大小和淋巴转移有关，FOXM1在HCC肿瘤发展和转移过程中可能发挥重要作用;
　　(2)人肝细胞肝癌中FOXM1表达与AFP的表达与分泌密切相关，FOXM1可能通过调节AFP的转录在促进AFP表达中发挥重要作用。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

第一部分：肝细胞肝癌中转录因子FOXM1的表达及其临床意义

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第二部分：重组FOXM1腺病毒的构建及表达效果验证

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第三部分：肝细胞肝癌中转录因子FOXM1调控AFP表达与分泌的分子机制初探

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

全文总结

文献综述 AFP转录调控机制研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文