五层龙提取物改善高果糖所致大鼠脂肪肝的重要分子靶点——肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c

摘要

目的:五层龙提取物(SOR)为治疗肥胖和糖尿病的传统中草药，这两种疾病都与脂肪肝密切相关。已有研究证实SOR具有改善脂肪肝的作用，但是其机制尚不清楚。本文旨在研究SOR改善高果糖所致大鼠脂肪肝的分子机制。
　　方法:选取24只健康SD大鼠随机分为4组(n=6)，饲养10周:(1)空白对照组:自由饮水;(2)果糖对照组:给予10％果糖水(w/v，每天配制);(3) SOR低浓度药物组:果糖溶液+SOR提取物5mg/kg;(4) SOR高浓度药物组:果糖溶液+SOR提取物20mg/kg。每三天记一次体重，并根据体重变化调整用药组大鼠给药量。用药组起始果糖水浓度均为10％，每天记录摄食量与饮用果糖水量，并计算果糖摄入量，根据果糖对照组近三天果糖摄入量，调整果糖水浓度使用药组大鼠果糖摄入量与果糖对照组一致。于第10周末，夜间禁食14h后，称重，乙醚麻醉下，摘除眼球取血，分离血浆检测TC、TG、血糖、NEFA及胰岛素含量;处死大鼠，取肝脏称重，行肝脏H.E染色和油红O染色，同时检测肝脏TG、TC含量;用TRIzol提取肝组织总RNA，逆转录获得cDNA，用Real-Time PCR方法检测肝脏脂质合成转录因子SREBP-1c、ChREBP及其下游相关基因FAS、ACC-1、SCD-1、LPK和脂质氧化相关基因PPAR-α、CPT-1α、ACO及PPAR-γ、 CD36的mRNA水平;提取肝细胞核蛋白，用Western blot方法检测调节脂质合成的两个关键转录因子SREBP-1c和ChREBP的蛋白表达量。实验数据应用StatView统计软件进行分析，以均数±标准误((x)±SEM)表示，t检验进行两组数据的差异比较。
　　结果:
　　1.生化指标:与空白对照组相比，果糖对照组的血浆TC、TG、血糖及胰岛素含量明显增加，而NEFA显著下降(P＜0.05);SOR用药组相对于果糖对照组，血浆TC、TG、血糖、胰岛素及NEFA均无明显改变(P＞0.05)。
　　2.肝相关参数:各组大鼠肝重与肝TC含量无差异（P＞0.05）;但果糖对照组与空白对照组相比，肝重与体重比、肝TG含量明显升高(P＜0.05); SOR（20mg/kg）显著下调果糖引起的肝TG含量的升高(P＜0.05)。
　　3.形态学显示:(1)H.E染色显示，果糖对照组肝细胞空泡化的程度较空白对照组明显增强，SOR(20mg/kg)明显改善肝细胞空泡化的程度。(2) ORO染色显示，与空白对照组比较，果糖对照组ORO染色阳性面积区域及阳性面积率明显增加(P＜0.05)，SOR(20mg/kg)具有明显的改善作用(P＜0.05)。
　　4.Real-Time PCR结果:果糖对照组相对于空白对照组，显著上调肝脏SREBP-1c、FAS、ACC-1、SCD-1、ChREBP及LPK mRNA的表达并下调ACO与CPT-1α mRNA的表达(P＜0.05)，对PPAR-γ、PPAR-α、及CD36mRNA无显著性影响（P＞0.05）;SOR（20mg/kg）明显抑制肝脏SREBP-1c、FAS、ACC-1、SCD-1及ChREBP mRNA的过表达(P＜0.05)，但对LPK、PPAR-γ、PPAR-α、ACO、CPT-1α及CD36mRNA无明显改变（P＞0.05）。
　　5.Western blot分析显示:与空白对照组比较，果糖对照组细胞核SREBP-1c和ChREBP的蛋白含量增加（P＜0.05），SOR(20mg/kg)明显抑制SREBP-1c核蛋白的表达(P＜0.05)，但没有显著改变ChREBP核蛋白含量(P＞0.05)。
　　结论：
　　1.SOR(20mg/kg)能够改善高果糖所致大鼠脂肪肝;
　　2.肝脏SREBP-1c是SOR改善高果糖诱导所致大鼠脂肪肝的重要分子靶点。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

1．3 统计学分析

2 实验结果

2．1 一般参数

2．2 生化指标

2．3 肝脏相关参数

2．4 肝脏的形态学改变

2．5 大鼠肝脏脂质代谢相关基因及蛋白的表达情况

3 讨论

4 结论

全文小结

参考文献

文献综述 五层龙对肝脏脂质代谢的研究进展

致谢

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