PML(NLS-)蛋白在NB4细胞和裸鼠移植瘤中定位的验证及其临床应用

摘要

第一部分PML(NLS-)蛋白在急性早幼粒细胞NB4细胞的表达及定位
　　目的:验证PML(NLS-)蛋白在NB4细胞的表达及定位。
　　方法:将质粒pCMV-HA-NE电转染NB4细胞，用Western blot法验证质粒转染成功;提取电转染质粒成功的NB4细胞、电转染pCMV-HA的NB4细胞、NB4细胞、K562细胞和正常人中性粒细胞的胞浆和胞核蛋白，用Western blot法检测PML(NLS-)蛋白的表达;免疫荧光法和激光共聚焦检测各种细胞中PML(NLS-)蛋白的定位。
　　结果:Western blot检测NB4-HA-NE细胞成功表达NE蛋白;NE酶成功切割PML-RARα，Western blot检测到NB4-HA-NE细胞胞浆表达PML（NLS-）蛋白，其他类型的细胞胞浆中几乎没有PML（NLS-）蛋白的表达，主要是胞核中表达PML蛋白;免疫荧光和激光共聚焦均可检测到NB4-HA-NE细胞中PML(NLS-)蛋白定位于细胞胞浆，其他类型的细胞中PML蛋白主要定位在细胞胞核。
　　结论:通过Western blot，免疫荧光，激光共聚焦三种方法证明PML(NLS-)蛋白存在于NB4-HA-NE细胞胞浆。
　　第二部分PML(NLS-)蛋白在裸鼠移植瘤中的表达及定位
　　目的:验证PML(NLS-)蛋白在体外裸鼠移植瘤中的表达及定位。
　　方法:通过给裸鼠皮下接种细胞，建立NB4细胞、K562细胞和NB4-HA-NE细胞裸鼠皮下瘤模型，提取细胞中的胞浆和胞核蛋白，用Western blot法检测各种细胞中PML(NLS-)蛋白的表达;免疫荧光，激光共聚焦和免疫组化法检测PML(NLS-)蛋白在移植瘤组织细胞中的定位。
　　结果:成功建立NB4细胞、K562细胞和NB4-HA-NE细胞裸鼠皮下瘤模型;Western blot，免疫荧光，激光共聚焦和免疫组化法检测到NB4-HA-NE细胞裸鼠移植瘤中的PML(NLS-)蛋白的表达且定位于细胞胞浆，而NB4和K562细胞裸鼠皮下瘤中PML蛋白主要定位于胞核。
　　结论:运用Western blot，免疫荧光，激光共聚焦和免疫组化法可以检测到PML(NLS-)蛋白在体外裸鼠移植瘤中定位在细胞胞浆。

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声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

参考文献

第一部分 PML(NLSˉ)蛋白在急性早幼粒细胞NB4细胞的表达及定位

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第二部分 PML(NLSˉ)蛋白在裸鼠移植瘤中的表达及定位

1．材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

第三部分 PML(NLSˉ)蛋白在临床标本中的表达及定位

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

全文总结

文献综述 急性早幼粒细胞白血病诊疗进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文